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超聲波細(xì)胞破碎儀的常見(jiàn)問(wèn)題及解決辦法(二)
超聲波細(xì)胞破碎儀的常見(jiàn)問(wèn)題及解決辦法(二)
3.變幅桿位置擺放也要注意,聽(tīng)聲音如果不對(duì)的話就要及時(shí)調(diào)整。另外可以從菌濃度方面考慮。在破碎時(shí)試著加大體積,強(qiáng)度*好不要超過(guò)60%.
4.嘗試超8s停8s,對(duì)有些菌體蛋白來(lái)說(shuō),你的方法很難散熱,導(dǎo)致蛋白變性產(chǎn)生氣泡,*好停頓時(shí)間稍長(zhǎng)一些,這種情況多見(jiàn)于包涵體形式的蛋白。
鏈霉菌(放線菌)超聲破碎(超聲波細(xì)胞破碎儀)的,用的方法條件是什么?
前處理一般就是配置成一定濃度的菌懸液。
使用超聲破碎時(shí)采用的具體條件是:
(1)取**的24h培養(yǎng)液于5000r/min下離心5min收集菌體.
(2)用pH7.5的Na2HPO-NaH2PO緩沖液洗滌3次,再用該緩沖液將菌體配成1:3的菌懸液.置于40
mL大塑料試管內(nèi).
(3)(超聲波細(xì)胞破碎儀)將大塑料試管置于冰浴中,采用超聲波破碎(功率200W,1/2”探頭,破碎30s,間歇30S).
(4)破碎液于12000r/min下高速冷凍離心30min,收集細(xì)胞碎片和上清夜。
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