(1)復制方法
1)模型制備 雄性大鼠，體重為200～250g。經(jīng)腹腔注射水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)麻醉后仰臥位固定，頭頸部皮膚去毛后常規(guī)**。在手術(shù)顯微鏡下沿后頸部正中于頭頸交界處作一長為4～5mm的縱向切口，鈍性分離肌肉，暴露環(huán)枕筋膜。先用4.5號注射針頭穿刺枕大池，抽出腦脊液0.06～0.1ml后再注入25％白陶土**混懸液0.1ml，注射時間不少于10min，注射完畢后留針5min。拔針后用醫(yī)用耳腦膠封閉針眼，縫合切口，并維持頭低位15～20min。對照組用同樣方法向枕大池注入生理鹽水0.1ml。術(shù)后給予抗感染**(慶大霉素每只每天2萬U：im，或頭孢唑啉鈉：50mg/kg，ip)連續(xù)5d。每日清潔傷口2次，直至傷口**。
操作在顯微鏡下進行可減少手術(shù)的死亡率。避免反復穿刺，穿刺時要維持頸部屈曲約30°，穿刺角度與水平線成60°～70°角，穿刺深度約1mm。
也可采用體重為10～15kg實驗犬。按30mg/kg體重的劑量經(jīng)靜脈注射鈉麻醉后，行枕大池穿刺，3ml腦脊液，并按0.3ml/kg體重劑量向枕大池注入等量的25％白陶土**混懸液。
2)評價指標
①腦積水的鑒定：可采用磁共振波譜成像儀行MRI檢測，獲取連續(xù)層厚1mm的腦冠狀切面T2圖像，并測定第三腦室平面?zhèn)饶X室大小，計算出側(cè)腦室指數(shù)(側(cè)腦室指數(shù)＝側(cè)腦室大橫徑/同一層面腦組織大橫徑)。
MRI顯示大鼠在注射25％白陶土混懸液1周后腦室明顯擴大，伴隨腦室周圍白質(zhì)水腫，至第4周時此病理現(xiàn)象更加明顯。
②標本的制作：在MRI檢測后用水合氯醛過量麻醉，開胸后迅速用4℃生理鹽水(50ml/100g)和4％的多聚甲醛(100ml/100g)經(jīng)心臟灌洗，然后取出腦組織，用10％甲醛固定24h后石蠟包埋，連續(xù)作厚約4μm的冠狀位切片，做常規(guī) HE染色，光鏡觀察。
3)病理組織學檢查 病理解剖發(fā)現(xiàn)大鼠腦表面蛛網(wǎng)膜下腔尤其是在小腦和腦干表面有白陶土沉積，蛛網(wǎng)膜下腔粘連閉鎖。白陶土注射后1～2周，大鼠腦室系統(tǒng)即有明顯擴大，以側(cè)腦室前角顯著。大腦皮層因受壓變薄，以頂葉明顯。海馬因受壓而變形，白質(zhì)內(nèi)細胞外間隙因水腫而擴大。白陶土注射后3～4周，腦室系統(tǒng)進行性擴大，腦室周圍白質(zhì)，尤其是胼胝體出現(xiàn)纖維扭曲和萎縮、間隙增寬、有纖維撕裂。
病理組織學檢查可見腦積水的各個階段都存在神經(jīng)細胞形態(tài)的改變，如線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、細胞核等變化。腦積水過程中深部皮質(zhì)錐體細胞突觸及其他突起減少，核周細胞質(zhì)邊緣濃度低，核糖體少見，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有空泡并腫脹，高爾基體少至罕見，大部分延伸的線粒體都有被破壞的嵴，中心粒減少。膠質(zhì)細胞小且少見，距神經(jīng)元遠。細胞外?？梢娍张轄铋g隙，有髓軸突含髓鞘層數(shù)少，稍大的神經(jīng)元輪廓經(jīng)常是半透明狀，且空泡化，沒有細胞質(zhì)成分。隨著腦積水的進展，上述變化更加明顯。在腦積水的晚期皮質(zhì)深部靠近白質(zhì)有固縮或死亡的神經(jīng)元，高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，多核糖體和單核糖體缺乏，無尼氏體，細胞核有完整的內(nèi)膜，染色質(zhì)少、分散，核周間隙有時擴大。
(2)模型特點 枕大池注入白陶土混懸液法，是在Del Bigio方法的基礎(chǔ)上加以改進的。根據(jù)手術(shù)方式的不同可分為經(jīng)皮穿刺枕大池注白陶土混懸液法和顯微鏡直視下枕大池注白陶土混懸液法，前者操作較簡便，穿刺帶有一定的盲目性，即使是在立體定向指引下操作，仍然容易導致腦組織尤其是腦干受損，死亡率較高。應(yīng)用顯微外科手術(shù)的方法減少了手術(shù)創(chuàng)傷，由于術(shù)中暴露了環(huán)枕筋膜，免了穿刺的盲目性，低了手術(shù)死亡率。術(shù)后運用醫(yī)用耳腦膠封閉穿刺點，減少白陶土滲漏，增加腦積水誘導成功率的關(guān)鍵。此模型術(shù)后顱內(nèi)壓上升相對較緩，適用于急、慢性腦積水的研究。
(3)比較醫(yī)學 該模型選擇的是成年大鼠，類似于臨床上**腦積水。此種模型是交通性腦積水動物模型的制作方法。它是通過導致蛛網(wǎng)膜下腔因無菌性炎癥而粘連閉鎖，從而在第四腦室出口水平阻塞腦脊液的循環(huán)通路，其發(fā)生機制與臨床上因顱內(nèi)感染、出血而形成腦積水的機制相似，不失為一個較好的腦積水模型。
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