1 單純皰疹病毒性方法

(1)復(fù)制方法  ①選用4～6周齡雌性Balb/c小鼠(體重為14～16g)，經(jīng)腹腔按45mg/kg體重的劑量注射麻醉后，置于顯微鏡下，用1ml注射器針頭交叉劃傷實(shí)驗(yàn)鼠眼角膜上皮呈田字形，將5μl 2×100000000PFU/ml病毒(HSV-1RE株)液滴在已劃傷的眼角膜表面。②體重為2.0～3.0kg的有色家兔，經(jīng)兔耳緣靜脈注射全身麻醉(25mg/kg體重)后，置于手術(shù)顯微鏡下。取直徑1.2mm毛細(xì)玻璃管吸取1ml病毒株液(用HSV-Ⅰ型病毒株系，采用Hela細(xì)胞培養(yǎng)，離心后上清液置-70℃低溫冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?，接種時取出復(fù)溫，病毒濃度為1.15×100000000PFU/ ml)，一端以橡皮泥封閉。固定兔眼，在全角膜范圍內(nèi)共接種25個點(diǎn)，接種時要求玻璃管垂直于角膜面，按環(huán)鉆操作法，鉆切深度以突破角膜上皮層為限。

(2)模型特點(diǎn)  ①模型鼠感染3d時眼角膜較1d時透明性差，出現(xiàn)樹枝狀病變，為典型改變；感染7d時角膜混濁失去透明性。②家兔眼角膜出現(xiàn)嚴(yán)重的樹枝狀角膜上皮炎，嚴(yán)重者發(fā)展為地圖狀角膜潰瘍。

(3)比較醫(yī)學(xué)  單純皰疹病毒性角膜炎是一種反復(fù)遷延性**，其發(fā)病率和致盲率均居角膜病的首位。本模型制作簡便、周期短，短期內(nèi)可大量復(fù)制，病毒接種48h后即可開始觀察，敏感性強(qiáng)，反應(yīng)均勻一致，48h后出現(xiàn)典型的樹枝狀角膜上皮炎。通過本模型可以客觀地反映**在早期快速**病毒抑制角膜炎癥的情況，為客觀準(zhǔn)確地判斷**療效提供了有效手段。

2 眼損傷型**性方法

(1)復(fù)制方法  體重2.0～2.5kg實(shí)驗(yàn)兔，飼養(yǎng)適應(yīng)1周，實(shí)驗(yàn)前檢查雙眼無異常。用速眠新滴于兔眼0.2～0.3ml/眼，3～5min家兔眼表現(xiàn)局部輕度麻醉，用環(huán)鉆壓迫角膜無反應(yīng)。先后用7mm和4mm直徑角膜環(huán)鉆輕輕按壓角膜順時針旋轉(zhuǎn)，造成環(huán)行創(chuàng)傷。拉開眼瞼成杯形，1ml注射器吸取2×10的12次方/L菌液(綠膿桿菌或化膿性鏈球菌)0.1ml滴于兔眼。

(2)模型特點(diǎn)  接種**24h后模型動物可出現(xiàn)典型角膜炎癥狀，第1、3、5日時**培養(yǎng)均呈陽性，鏡下病理組織學(xué)觀察可見角膜水腫、充血，上皮細(xì)胞剝脫、潰瘍，傷口未**，并有大量炎癥細(xì)胞浸潤。

(3)比較醫(yī)學(xué)  角膜無血管，其營養(yǎng)來源于房水、淚腺和角膜緣****。**性角膜炎炎癥期損傷部位的上皮層及實(shí)質(zhì)層細(xì)胞可釋放出蛋白水解酶，導(dǎo)致潰瘍變深和增大，眼結(jié)膜和淚腺也參與炎癥反應(yīng)，表現(xiàn)結(jié)膜**充血，**細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞增多。淚液可沖洗結(jié)膜囊和角膜表面，淚液中含有某些**性溶菌酶、**球蛋白具有**作用。但機(jī)體修復(fù)快慢與角膜損傷深淺、**毒力強(qiáng)弱、感染**量多少有密切的關(guān)系。本模型選用的革蘭陰性綠膿桿菌和革蘭氏陽性化膿性鏈球菌均是眼科致病較強(qiáng)的**，該菌可產(chǎn)生多種溶解酶引起局部組織的降解，導(dǎo)致機(jī)體對**產(chǎn)生炎性反應(yīng)表現(xiàn)角膜組織破壞甚至穿孔。本模型方法簡便，容易操作，可適用于臨床上眼科用****篩選方面的研究。

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