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食管狹窄動物模型

(1)復(fù)制方法  取8~14kg的成年Beagle犬,用****鈉按30mg/kg體重的劑量靜脈注射麻醉,然后將犬側(cè)臥固定于手術(shù)臺上,頸部手術(shù)區(qū)常規(guī)**剃毛;用無菌手術(shù)切開頸部皮膚,游離出食管壁。于犬后腿外側(cè)取大小約為2cm×2cm×3cm闊筋膜1塊,在內(nèi)鏡引導(dǎo)下置入食管支架,使其上端定位于頸部游離段食管,將闊筋膜附著于置架部位的食管外壁,用醫(yī)用不銹鋼絲兩處縫合固定,一方面可加強(qiáng)食管壁的韌性;另一方面可防止縫線掛穿食管壁。造模手術(shù)過程中局部注射少量青霉素,術(shù)后模型動物給予半流質(zhì)飲食飼養(yǎng),常規(guī)飼養(yǎng)條件下觀察1~10周。置架期間每天仔細(xì)觀察模型犬一般情況及體重、飲食變化。模型犬置架部位的食管內(nèi)徑、食管壁各層組織的形態(tài)學(xué)變化,經(jīng)定期對模型動物食管作光鏡及電鏡標(biāo)本病理組織形態(tài)學(xué)觀察,經(jīng)結(jié)果分析均表現(xiàn)出明顯的食管狹窄及形態(tài)學(xué)改變特征。


(2)模型特點(diǎn)  模型動物術(shù)后第2日即可恢復(fù)飲食,支架術(shù)后3周內(nèi)模型動物飲食量與術(shù)前相比無異常,體重也無明顯減輕,但活動度較術(shù)前明顯減少,動物未出現(xiàn)反復(fù)嘔吐及哽噎的現(xiàn)象。置架3周后模型犬進(jìn)食量明顯減少,開始出現(xiàn)反復(fù)嘔吐及持續(xù)吞咽動作,體重較術(shù)前明顯減輕,活動度也進(jìn)一步減少。術(shù)后2周模型動物食管組織明顯增生,絕大部分支架結(jié)構(gòu)已被增生組織所覆蓋,食管黏膜廣泛充血、水腫,偶可見壞死、滲出、潰瘍,置架部位食管壁明顯增厚,支架兩端食管壁較管身部分增生更加明顯。術(shù)后4周模型動物食管組織檢查,可見大量增生的組織已完全覆蓋于支架內(nèi)壁并連接成片,支架深嵌于食管壁內(nèi),管腔較正常明顯狹窄,黏膜仍輕度充血,偶有壞死及潰瘍形成。術(shù)后8周置架食管的大體形態(tài)與4周相似,但增生組織越過支架結(jié)構(gòu)向管腔內(nèi)廣泛延伸,管腔顯著狹窄。光鏡下觀察顯示:支架術(shù)后1周的食管組織中鱗狀上皮明顯增生、變厚,細(xì)胞層次紊亂,基底層細(xì)胞體積增大、胞核深染,上皮基底層與固有層呈交錯狀態(tài);黏膜下層充血、血管增生、炎癥細(xì)胞浸潤、纖維結(jié)締組織形成,可見散在分布的成纖維細(xì)胞。術(shù)后2周,鱗狀上皮沿支架網(wǎng)眼不規(guī)則交錯生長,上皮細(xì)胞致密、核深染、體積增大,黏膜下腺體明顯減少,有大量炎癥細(xì)胞浸潤,成纖維細(xì)胞明顯增多,纖維組織增生較前加劇,肉芽組織增生明顯,肌層變薄。術(shù)后4周,上皮形態(tài)同術(shù)后2周相似,但固有層腺體幾乎消失,可見大量纖維組織增生,明顯致密,仍可見散在炎癥細(xì)胞浸潤,成纖維細(xì)胞明顯減少,肌層明顯萎縮變薄。術(shù)后8周組織的光鏡下形態(tài)與術(shù)后4周基本一致,上皮細(xì)胞排列趨于整齊;上皮下纖維組織進(jìn)一步增多、致密,炎癥細(xì)胞明顯減少。支架上端、中部、下端增生組織的病理變化基本一致。電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察顯示:術(shù)后1周,食管黏膜上皮基底層細(xì)胞胞核體積增大,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見大量粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng);上皮淺層細(xì)胞間隙擴(kuò)大。術(shù)后2周,黏膜下層可見處于旺盛分泌狀態(tài)的成纖維細(xì)胞,胞核體積較大,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富。術(shù)后4周組織中仍可見活躍的成纖維細(xì)胞,細(xì)胞突起周圍可見散在的纖維束形成。術(shù)后8周組織中也可見大量的纖維束形成。


(3)比較醫(yī)學(xué)  采用本方法建立的食管狹窄動物模型,由于應(yīng)用了“自體闊筋膜移植固定法”置入食管支架,經(jīng)術(shù)后1周復(fù)查,所有支架均能有效地固定于食管腔內(nèi),術(shù)后2周內(nèi)未發(fā)生與手術(shù)相關(guān)的并發(fā)癥,模型成功率高達(dá)100%。手術(shù)中采用醫(yī)用不銹鋼細(xì)絲縫合,從而避免了斷裂的可能;采用自體闊筋膜加固,由于闊筋膜的特性具有以下優(yōu)點(diǎn):既能防止掛穿食管壁,又有局部修復(fù)作用,同時避免了異物刺激食管壁而引起增生。因此,與其他方法建立的食管支架術(shù)后狹窄動物模型相比,本方法復(fù)制的“食管支架術(shù)后再狹窄”動物模型,具有方法簡便、結(jié)果可靠、造模周期短、樣本消耗少、模型成功率高等優(yōu)點(diǎn)。但由于造模時需對食管動手術(shù),可引發(fā)食管壁局部產(chǎn)生不同程度的創(chuàng)傷性炎癥,對模型動物的使用及結(jié)果評價有一定的影響。


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