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栓塞性腦梗死動(dòng)物模型

1 犬腦栓塞模型

(1)復(fù)制方法  取狗靜脈血同一定比例的凝血酶混合,快速吸人內(nèi)徑0.8mm的玻璃管內(nèi),垂直放置在4℃,待血塊完全收縮后通過(guò)頸動(dòng)脈插管至頸內(nèi)動(dòng)脈水平段,注入血栓

(2)模型特點(diǎn)  經(jīng)血管造影證實(shí),該方法可形成可靠的大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO),并可用于溶栓**研究,但操作方法較復(fù)雜。


2 兔腦栓塞模型

2.1 耳動(dòng)脈栓子

(1)復(fù)制方法  健康家兔1只,雌雄不拘。用改良腰穿針穿刺兔耳動(dòng)脈,搔刮損傷約2cm長(zhǎng)的血管內(nèi)膜,損傷段動(dòng)脈近端部分結(jié)扎。24h后切除形成血栓的動(dòng)脈段,在顯微鏡下取出栓子,剪成若干個(gè)0.5mm×0.5mm片段,取3個(gè)片段注入頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。

(2)模型特點(diǎn)  該栓子是在動(dòng)脈內(nèi)膜受損后形成的,富含纖維蛋白和血小板,與人類動(dòng)脈粥樣硬化形成的血栓相似,更適合溶栓**的研究。其缺點(diǎn)是栓子制備時(shí)間長(zhǎng),制作方法較復(fù)雜。用組織型纖溶酶原激活物(tPA)和尿激酶溶栓的成功率分別只有38%和35%,使其應(yīng)用受到限制。


2.2 含放射性標(biāo)記物的栓子

(1)復(fù)制方法  用兔全血與凝血酶、氯化鈣及放射性標(biāo)記物混合為單個(gè)栓子制成MCAO,通過(guò)頭顱X線平片及放射性檢測(cè)來(lái)確定栓子的部位及溶栓的效果。

(2)模型特點(diǎn)  該方法避免了多次血管造影造成的動(dòng)物死亡,使操作更簡(jiǎn)單省時(shí)。


3 大鼠腦栓塞模型

大鼠是用于腦栓塞模型*廣泛的為研究對(duì)象。其原因是:①價(jià)格低廉。②近親繁殖、品種純化,腦血管解剖變異小。③腦血管解剖及生理接近人類。④動(dòng)物存活時(shí)間長(zhǎng),能進(jìn)行腦缺血病理過(guò)程的研究。⑤血管損傷部位恒定,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好。常用的大鼠血栓栓塞性腦梗死模型如下:


3.1 微栓子懸液

(1)復(fù)制方法  大鼠雌雄不拘。大鼠心臟取血,室溫下放置48h形成血栓,用注射器抽吸血凝塊注入生理鹽水中,重復(fù)3次形成小栓子懸液。抽吸0.2ml(栓子100~250μm)從頸總動(dòng)脈(CCA)注入ICA,可形成腦內(nèi)多發(fā)性腦梗死。

(2)模型特點(diǎn)  該模型形成的梗死比例高,而且注入感染的栓子還可進(jìn)行腦膿腫的研究。其缺點(diǎn)為,栓子部位不恒定,無(wú)法預(yù)測(cè)梗死部位及范圍;小栓子易進(jìn)入外周的分支漂流至整個(gè)的動(dòng)脈樹而引起雙側(cè)大腦半球多處小面積梗死;除大腦中動(dòng)脈、前脈絡(luò)膜動(dòng)脈栓塞外,常伴有大腦前動(dòng)脈和大腦后動(dòng)脈的小面積梗死,甚至有對(duì)側(cè)梗死,與人類卒中不符;由于側(cè)支循環(huán)的影響使組織缺血程度不一,不利于組織定量分析。


3.2 幾個(gè)規(guī)則小栓子

詳見(jiàn)局灶性腦缺血模型中血栓法。此方法優(yōu)勢(shì)明顯,是常用的血栓栓塞法。其不足之處在于,因栓子數(shù)目較多(14~16個(gè)),ICA顱內(nèi)段被完全堵塞,導(dǎo)致大腦動(dòng)脈(Willis)環(huán)后半部不通而不能由同側(cè)動(dòng)脈注入溶栓**。但若用較少的血栓則易發(fā)生自溶。

有學(xué)者進(jìn)行了方法的改進(jìn),即將抗凝的動(dòng)脈血離心后取血小板含量低的血漿與一定比例的凝血酶和氯化鈣溶液混合,制成栓子,將其剪成2mm的小段,依次吸入6個(gè)血栓從頸外動(dòng)脈(ECA)注入ICA。該模型的優(yōu)點(diǎn)是:①血栓富含纖維蛋白,因用了血小板含量低的血漿,血栓不再發(fā)生收縮,制備好后不需放置,可立即注入體內(nèi)造成MCA0而不發(fā)生自溶。②只需一次麻醉動(dòng)物,手術(shù)操作時(shí)間短。③用6個(gè)這樣血栓正好行成MCAO而不會(huì)堵住發(fā)出大腦前動(dòng)脈之前的頸內(nèi)動(dòng)脈,從而保證了大腦動(dòng)脈(Willis)環(huán)后半部的暢通;④該模型可重復(fù)性好,能形成穩(wěn)定的MCAO,成功率幾乎達(dá)100%。


3.3 小鼠腦栓塞模型

(1)復(fù)制方法  將股動(dòng)脈血抽入一PE-50管內(nèi),室溫下放置2h,4℃放置22h,然后剪下5cm栓子吸入一個(gè)充滿鹽水的40cm PE-10管,管的兩端各連接一個(gè)有生理鹽水的注射器,使鹽水反復(fù)通過(guò)PE-10管,制成一富含纖維素的單栓子。常規(guī)方法分離一側(cè)CCA、ICA和頸外動(dòng)脈ECA,結(jié)扎ECA遠(yuǎn)端,微血管夾暫時(shí)夾閉CCA、ICA。將一個(gè)外徑為0.15~0.18mn2的導(dǎo)管輕輕由ECA插入ICA 8mm(距 MCA起始段1.0~1.5mm),注入栓子。

(2)模型特點(diǎn)  該模型的優(yōu)點(diǎn):①大血管栓塞與人類卒中類似。②在體外模擬動(dòng)脈壓力及循環(huán)制成的栓子富含纖維蛋白和血小板(白色血栓),可用于溶栓研究。③可重復(fù)性強(qiáng),可預(yù)測(cè)供血區(qū)梗死體積。其缺點(diǎn)為注入血栓時(shí)操作難度較大,蛛網(wǎng)膜下腔出血發(fā)生率較高(40%)。

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