染色質(zhì)**沉淀技術(shù)
染色質(zhì)**沉淀技術(shù)(ChromatinImmunoprecipitation，簡(jiǎn)稱(chēng)ChIP)是研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的一種技術(shù)。它利用抗原抗體反應(yīng)的特異性，可以真實(shí)地反映體內(nèi)蛋白因子與基因組DNA結(jié)合的狀況。特別是由于該技術(shù)不斷的發(fā)展和完善，其應(yīng)用范圍已經(jīng)從研究目的蛋白與已知靶序列間的相互作用，發(fā)展到研究目的蛋白與整個(gè)基因組的未知序列的相互作用;從研究一個(gè)目的蛋白與DNA的相互作用，發(fā)展到研究?jī)蓚€(gè)蛋白與DNA共同結(jié)合的相互作用;從研究啟動(dòng)子區(qū)域的組蛋白的修飾，發(fā)展到研究結(jié)合在DNA序列上的蛋白復(fù)合物。隨著對(duì)基因功能研究的不斷深入，這項(xiàng)技術(shù)正越來(lái)越多的被應(yīng)用于科研的各個(gè)領(lǐng)域。已經(jīng)有成熟的ChIP試劑盒出售，如Millipore公司提供的EZ-ChIP試劑盒，使得越來(lái)越多的研究者更容易地采用染色質(zhì)沉淀技術(shù)在許多研究領(lǐng)域取得了成功。

染色質(zhì)**沉淀技術(shù)的原理是:在生理狀態(tài)下把細(xì)胞內(nèi)的DNA與蛋白質(zhì)交聯(lián)在一起，通過(guò)超聲或酶處理將染色質(zhì)切為小片段后，利用抗原抗體的特異性識(shí)別反應(yīng)，將與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段沉淀下來(lái)。染色質(zhì)**沉淀技術(shù)一般包括細(xì)胞固定，染色質(zhì)斷裂，染色質(zhì)**沉淀，交聯(lián)反應(yīng)的逆轉(zhuǎn)，DNA的純化，以及DNA的鑒定。因?yàn)?/span>ChIP實(shí)驗(yàn)涉及的步驟多，結(jié)果的重復(fù)性較低，所以對(duì)ChIP實(shí)驗(yàn)過(guò)程的每一步都應(yīng)設(shè)計(jì)相應(yīng)的對(duì)照，而且對(duì)結(jié)果的分析也需要有的經(jīng)驗(yàn)。對(duì)于剛剛開(kāi)始使用ChIP技術(shù)的研究人員來(lái)說(shuō)，使用成熟的商品化試劑盒和相關(guān)的技術(shù)服務(wù)會(huì)達(dá)到事半功倍的效果，比如Millipore公司的EZ-ChIP試劑盒就是專(zhuān)門(mén)為初學(xué)者設(shè)計(jì)的入門(mén)產(chǎn)品。

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