細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，培養(yǎng)細(xì)胞一一旦污染，一般情況下，都會(huì)比較難處理。如果污染細(xì)胞作用不大，可以不要了；有細(xì)胞株留存的或可購(gòu)置的，可在找到原因后進(jìn)行的**操作室，復(fù)蘇或者重新購(gòu)置細(xì)胞，再進(jìn)行培養(yǎng)。若污染細(xì)胞作業(yè)很大，又難于重新得到，可以實(shí)施以下辦法進(jìn)行**。

（一）使用***

***對(duì)殺滅**較有效。聯(lián)合用藥比單獨(dú)用藥效果好。預(yù)防用藥比污染后再用藥效果好。預(yù)防用藥一般用雙***（青霉素100u/mL加鏈霉素100μg/mL），污染后**用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時(shí)，再換常規(guī)培養(yǎng)液。此法在污染早期可能有效。所用***品種除青霉素、鏈霉素外，還可用慶大霉素、卡那霉素、多粘菌素、四環(huán)素、制霉菌素等。常用400～800μg/mL卡那霉素或200μg/mL四環(huán)素處理，每隔2～3日換液1次，傳1～2代進(jìn)行**。近年來(lái)有報(bào)道，4-氟，2-羥基喹啉（Ciprofloxacin,Cip）、截耳素衍生物（Pleu-romutilinderivative,BM-Cyclin2:BM-1和四環(huán)素衍生物（BM-2）等三種***單用或合用對(duì)殺滅支原體有效。這三種***均用PBS配成250X濃縮液，-20℃保存?zhèn)溆?，使用濃度Cip為10μg/mL，BM-1為10μg/mL，BM-2為5μg/mL。使用時(shí)先吸除污染的培養(yǎng)液，加入含BM-1的RPMI1640培養(yǎng)液，3天后再吸除培養(yǎng)液，加入含BM-2的RPMI1640培養(yǎng)液，培養(yǎng)4天，如此連續(xù)3個(gè)輪次，直至用33258熒光染色鏡檢證明已**支原體后，再加正常培養(yǎng)液培養(yǎng)傳代3-4次。

（二）使用支原體特異性血清

用5%的兔支原體**血清（血凝效價(jià)1:320以上）可去除支原體污染，因特異抗體可抑制支原體生長(zhǎng)，故經(jīng)抗血清處理后11天即轉(zhuǎn)為陰性，并且5個(gè)月后仍為陰性。但此法比較麻煩，不如用***方便、經(jīng)濟(jì)。

（三）加溫處理

將污染的組織培養(yǎng)物放在41℃培養(yǎng)18小時(shí)，可殺死支原體，但對(duì)細(xì)胞有**影響。所以在處理前要進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，摸索能大限度殺死支原體又對(duì)細(xì)胞影響小的加熱時(shí)間。此法有時(shí)不可靠。若先用**處理后，再以41℃加溫處理效果更佳。

（四）其他方法

除了上述去除污染的方法外，還有動(dòng)物體內(nèi)接種**法、巨噬細(xì)胞吞噬法、污染培養(yǎng)瓶中加溴尿嘧啶再用光照射的方法及過(guò)濾法等，但均較麻煩，且效果不確定。所以一旦支原體污染，除非有特別重要價(jià)值，一般均棄之重新培養(yǎng)。

溫馨提示：基爾頓生物科技（上海）有限公司，主營(yíng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)，更為可喜的是，公司于2015年投資建立了1800平方米的動(dòng)物中心，能夠?yàn)閺V大客戶提供更為專業(yè)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)及造模服務(wù)。

時(shí)光荏苒，通過(guò)全體員工的共同努力，公司具備從上游的高通量篩選到下游特定基因功能解析的完善整合技術(shù)平臺(tái)，能夠真正為客戶提供專業(yè)、完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。