商品屬性：
貨號
規(guī)格
產(chǎn)品名稱
A-PJ1093-1250U
1250U
PBCV DNA連接酶
A-PJ1093-5KU
5KU
儲存條件：
PBCV DNA連接酶儲存：-20℃可保存 2 年。
產(chǎn)品介紹：
PBCV DNA 連 接酶 也稱為 SplintR 連接酶 或 Chorella 病毒 DNA 連接酶，它能夠高效催化相鄰的 DNA 核苷酸的連接，這個連接過程需要一條互補的 RNA 在兩條 DNA 單鏈間起“夾板”或“橋梁”的固定作用。PBCV DNA 連接 酶的這種活性遠遠優(yōu)于傳統(tǒng)的 T4 DNA 連接酶，有助于 miRNAs 和 mRNAs，包括 SNPs 在內(nèi)的研究方法的**。 另外，在二代測序和分子診斷等眾多領域中，PBCV DNA 連接酶是富集目的基因的理想選擇。它具有穩(wěn)定的生物活 性，對 RNA 介導固定的 DNA 底物親和性強（米氏常數(shù) Km = 1 nM），能夠在復雜的混合物中檢測到亞納摩爾級的特 定 RNA。因此，在 RNA 檢測技術中，PBCV DNA 連接酶 不失為*佳選擇用酶。
活性定義：
25°C 反應 30 分鐘條件下，使 1pmol 的 DNA:RNA 雜交底物連接所需要的酶量定義為 1Unit。 反應溫度及失活該酶的*佳反應溫度為 25°C，可在 16-37°C 之間優(yōu)化，37℃可明顯提高反應的特異性；該酶在 65°C 加熱 20min 即可失活。
使用方法：
1. 連接反應 連接底物（1 μM） 2 μl 10×PBCV Ligase Buffer 2 μl PBCV DNA Ligase(25 U/μl) 1 μl **水 up to 20 μl 25°C 反應 15-60min。 2. 65°C 加熱 20min，使酶失活。 注意事項 1.該酶對一價陽離子非常敏感，如 NaCl 或 KCl 的濃度應低于 50 mM。 2. 該酶的反應溫度為16~37°C，*佳溫度為25℃。 3. 連接效率隨著夾板 RNA 長度的減少而降低，當長度小于等于 10nt 時，連接效率為零。
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