1. 細(xì)胞樣本

   懸浮細(xì)胞：

   4℃，1000-2000×g離心10 min收集細(xì)胞，按照106個(gè)細(xì)胞加入300-500 μL勻漿介質(zhì)的比例加入勻漿介質(zhì)，進(jìn)行機(jī)械勻漿，充分破碎（無明顯的細(xì)胞沉淀，可在顯微鏡下觀察），4℃，10000×g離心10 min，取上清置于冰上待測(cè)，若不能當(dāng)天檢測(cè)，于-80℃保存，可保存一個(gè)月。

   貼壁細(xì)胞：

   吸棄培養(yǎng)液，用PBS（0.01 M，pH 7.4）將細(xì)胞洗一遍。用細(xì)胞刮刮下細(xì)胞（不能用胰酶和EDTA處理），加入2-5 mL PBS（0.01 M，pH 7.4），收集細(xì)胞懸液，后處理方法見懸液細(xì)胞處理方法。

2. 10%組織勻漿

   取0.020-1.0 g新鮮組織塊，用2-8℃的PBS（0.01 M，pH 7.4）漂洗，去除血液，濾紙吸干，稱重，放入勻漿容器中，按照重量（g）：體積（mL）=1:9的比例加入2-8℃的勻漿介質(zhì)，進(jìn)行勻漿，4℃，10000×g離心10 min，取上清置于冰上待測(cè)，若不能當(dāng)天檢測(cè)，于-80℃保存，可保存一個(gè)月。

3. 線粒體樣本

   將10%組織勻漿，4℃，1500×g離心10 min，將上清液4℃，10000×g離心15 min，棄去上清，沉淀即為線粒體。加入勻漿介質(zhì)溶解后待測(cè)。

4. 脂肪組織

   取新鮮組織塊（20 mg-1.0g），按照重量（g）：體積（mL）=1:9的比例加入2-8℃的勻漿介質(zhì)，進(jìn)行勻漿，4℃，1500×g離心10 min，用棉簽吸取上層乳白色液體，吸取中層澄清液體待測(cè)。

5. 微生物樣本

   將菌液于4℃、1000-2000×g離心10 min收集xi菌，用PBS（0.01 M，pH 7.4）將菌沉淀洗2-3遍，然后按照原菌液體積的1/5-1/10加入裂解液（一般為50 mM Tris-HCl，pH 8.0，2mM EDTA，100 mM NaCl，加溶菌酶至100 ug/ml，0.1% Triton X-100，具體情況根據(jù)所測(cè)指標(biāo)選擇）重懸菌體，在冰水浴條件下，超聲破碎（條件一般是300w，超聲10s間隔10s，總時(shí)間10分鐘，具體條件可根據(jù)自身情況而定）。

如何判斷是否超聲完全：

 ① 外觀判斷：超聲前菌懸液是渾濁的，超聲完全后變的透明、清澈。

 ② 液體的粘滯性：超聲后菌液從槍頭滴下不粘連。

 ③ 高速離心：有用高速離心檢測(cè)超聲破碎程度的（一般用6000×g離心10 min，比一般離心收集菌體的轉(zhuǎn)速高一點(diǎn)）。沉淀是未破碎或破碎不完全的菌體。

一些需要注意的問題：

 ① 如果超聲時(shí)出現(xiàn)黑色沉淀，說明超聲功率太強(qiáng)。

 ② 超聲時(shí)間太長(zhǎng)、功率太高對(duì)蛋白活性肯定有影響。

 ③ 盡量防止泡沫的產(chǎn)生。