儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)**的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測(cè)個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高，熒光信號(hào)強(qiáng)

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾高壓。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。

檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 (HHSEC) ( 5×105 )四己基化銨(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)Tetrahexylammonium Iodide

CL-0067COLO 320(人結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2四戊基化銨(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)Tetraamylammonium Iodide

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3 大鼠牙細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL四庚基化銨(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)Tetraheptylammonium Iodide

LOVO/Adr 結(jié)腸癌阿霉素耐藥株四苯基化膦(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Tetraphenylphosphonium Iodide

EML1 Others Human 人 EML1 / TLT-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 四苯硼鈉質(zhì)量規(guī)格：AR tetraphenylboron
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1 腺癌細(xì)胞，SK-BR-3細(xì)胞 RK-13細(xì)胞，兔腎細(xì)胞系DL-胱氨酸DL-Cystine質(zhì)量規(guī)格：0.98

SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系 HumanN-氧基曲唑酮Trazodone N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4'-羥基鹽酸曲唑酮4'-Hydroxy Trazodone HCl質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-裂解物HEK-a L鹽酸伐倫克林標(biāo)記15N3Varenicline  Labeled 15N3質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

HK3 Others Human 人 Hexokinase-3 / HK3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 內(nèi)酰胺伐倫克林Varenicline Lactam質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
B16BL6細(xì)胞，小鼠色素瘤細(xì)胞 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM932人參皂甙Rb2，英文名或英文縮寫(xiě)：Ginsenoside Rb2，級(jí)別：AR，99.5%，規(guī)格：100克

CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 標(biāo)簽)鄰甲基對(duì)苯鹽 2,5-Diamino sulfate,97% 615-50-9 25G 通用試劑

SH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 過(guò)氧化月桂酰; Lcuroyl pqroxidq;Dodqccnoyl pqroxidq;clpqrox C; 102-74-8

人耐VP16絨癌細(xì)胞株;JEG-3/VP16片shēng huà shì jì容量：25克

CD68 Others Human 人 CD68 / Macrosialin / Gp110 (aa 1-319) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 紅 3BNA
質(zhì)粒小量提取試劑盒   Plasmid Exaction Kit  Torososide A  中文名：  分子式：C38H32O15  度：%

質(zhì)粒大量提取試劑盒（非柱式法）   5T  Tranexamic acid  中文名：凝血酸  分子式：C8H15NO2  度：98.0%

質(zhì)粒大量提取試劑盒   5T  Uzarigenin digitaloside  61217-80-9  中文名：  分子式：C30H46O8  度：97.5%  關(guān)鍵詞： 嗜肺軍團(tuán)菌試劑盒恒溫?zé)晒夥?/span> 夾竹桃; 強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

質(zhì)粒大量提取試劑盒   5T  trans-4-Aminocyclohexanol  中文名：  分子式：C6H13NO  度：98.0%

志賀氏菌(SH)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>)   48T  Trazodone   中文名：鹽酸曲唑酮  分子式：C19H23Cl2N5O  度：98.0%

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