產(chǎn)品名稱: 人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒操作方法
英文名稱:human major vault protein, MVP Elisa Kit
產(chǎn)品貨號(hào):XG-H63959
規(guī)格 :48T/96T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒操作方法 英文名稱:human major vault protein, MVP Elisa Kit 靈敏性高,高效性,原裝進(jìn)口抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無(wú)效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。 48T/96T。
流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100μL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測(cè)溶液A100μL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測(cè)溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè), 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
操作步驟:
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7、溫育:操作同3。
8、洗滌:操作同5。
9.在確保酶標(biāo)板底無(wú)水滴及孔內(nèi)無(wú)氣泡后,立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度 (O.D. 值)。
10、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
11、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
12、測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
原代骨骼肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of
cells包裝:500/250/100ml鹽酸鑭六水(>99%,BR)Lanthanum
(III) chloride, hexahydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
ROBO4 Others Human 人 ROBO4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三氧化鉬(>98%,BR)Molybdic
oxide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
MDCK 狗腎細(xì)胞木瓜蛋白酶懸浮液Papain 2x crystallized from
papaya Latex質(zhì)量規(guī)格:比活度:>20 U/mg,BC
散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21苯磺酸鈉(>98%,BR)
benzenesulfonate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
U-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞過(guò)氧化物歧化酶(SOD)Superoxide dismutase
from Bovine Erythrocytes(SOD)質(zhì)量規(guī)格:比活度:>5000 U/mg,BC
大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞;RIN-m5FN-(2-羧乙基)亞氨基二乙酸(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic
Acid
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin /
HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic
Acid
T-107A中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL皂土(膨潤(rùn)土)(Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑)質(zhì)量規(guī)格:Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑Bentonite
HEp-2細(xì)胞,人喉表皮樣癌細(xì)胞 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,HUVE-12/CRL2480細(xì)胞 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21皂土(膨潤(rùn)土)(Bentone SD-2,適于中高極性溶劑)質(zhì)量規(guī)格:Bentone SD-2,適于中高極性溶劑Bentonite
C2C12(小鼠成肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2活性炭粉(AR,200目,粉末狀,褐色)質(zhì)量規(guī)格:AR,200目,粉末狀,褐色Activated
charcoal
CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫氫化鈉水合物,英文名或英文縮寫(xiě):wo7ium
xy7nosulfide hydrate,級(jí)別:3.5N,200-250目,規(guī)格:25克
MPC-83 胰腺腺泡細(xì)胞癌尿酸鈉 Uric acid salt 1198-77-2 1G 通用試劑
IMR-32人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 IMR-32 human neuroblastoma
cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSL-半胱安醋酯言醋鹽 L-C
ICAM3 Others Human 人 CD50 / ICAM3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4,4'-(六氟異亞丙基)二酞1(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic
Anhydride
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5
Carrying P5b/dhfr3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(T)3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic
Dianhydride
RGMA Others Human 人 RGMA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三環(huán)[6.4.0.02,7]十二烷-1,8:2,7-四羧酸二酐(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Tricyclo[6.4.0.02,7]dodecane-1,8:2,7-tetracarboxylic
Dianhydride
A375 人惡性色素瘤細(xì)胞ε-己內(nèi)酯(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)ε-Caprolactone
C6-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 C6-EGFP-puro
(leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+2ug/ml
puromycin四氫生物蝶呤(THB)二鹽酸質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Tetrahydrobiopterin (THB) di
人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒操作方法檢測(cè)程序:公司產(chǎn)品僅用于科研,
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。
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