公司產(chǎn)品僅用于科研人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)ELISA試劑盒操作方法 英文名稱:Human Calreticulin, CRT Elisa Kit 靈敏性高,高效性,原裝進(jìn)口抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無(wú)效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。 48T/96T。
產(chǎn)品名稱 |
人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)ELISA試劑盒操作方法 |
英文名稱 |
Human Calreticulin, CRT Elisa Kit |
貨號(hào) |
XG-H63984 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody
Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標(biāo)本類型;
5.節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
樣本處理及要求:
1血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請(qǐng)廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過(guò)50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,zui好使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無(wú)微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室**防護(hù)條列執(zhí)行。
腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of
cells包裝:5 × 105方(1ml)鹽酸丁卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)Tetracaine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定
BA/F3細(xì)胞,小鼠原B細(xì)胞 人浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞,CCD-1095Sk細(xì)胞 NeuroFectagen? 神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒苯甲唑啉鹽酸鹽/鹽酸妥拉唑林Tolazoline HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)口原裝
非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E61酸托特羅定Tolterodine Tartrate質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,M受體(毒蕈堿型乙酰膽堿受體)拮抗劑
IL13 Others Human 人 IL-13 / Ierleukin-13 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1酸托特羅定(標(biāo)準(zhǔn)品)Tolterodine Tartrate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
幼蚊細(xì)胞;C6/36托吡酯Topiramate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5BR-(+)-巴氯芬鹽酸鹽R-(+)-Baclofen 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
IL6ST Others Mouse 小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 倍氯米Beclomethasone質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
III型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL10-羥基華法林(非對(duì)映)10-Hydroxy Warfarin (Mixture of Diastereomers)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
U-87MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-87MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS3'-羥基華法林3'-Hydroxy Warfarin質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
IL5 Protein Canine 重組狗 IL5 蛋白 (His 標(biāo)簽)8-羥基華法林8-Hydroxy
Warfarin質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
SK-BR-3(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 狗 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Ammoniumdibasic枸櫞酸氫二1克CP,95%
人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)ELISA試劑盒操作方法人胚腎細(xì)胞;293FT1-錄2-肖基本 2-nitnochlorobqnzqnq
CLEC10A Others Mouse 小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ACHE乙酰膽堿酯酶100克生物技術(shù)級(jí),200 u/mg,粉末
HCC1937 人癌細(xì)胞metxANOL(NOTACCEPTABLEFORSHIPM
Ke-3細(xì)胞,腎癌(瘤株) 人內(nèi)膜癌細(xì)胞,RL95-2細(xì)胞 人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHIMEC NA安替比林(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:≥99%(GC),標(biāo)準(zhǔn)品Antipyrine
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C安替比林質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)口分包Antipyrine
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 麝香草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Thymol
615小鼠前胃癌瘤株;Fc熒光素鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Fluorescein di salt
人雪旺細(xì)胞 ( HSC) ( 5×105 )鹽酸班布特羅(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Bambuterol
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