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產(chǎn)品名稱(chēng):糖原磷酸化酶a(GPa)比色法檢測(cè)試劑盒100管/96樣
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法:微量法
商品介紹:
測(cè)定意義:
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個(gè)斷開(kāi)α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點(diǎn)前4個(gè)葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無(wú)活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。糖原的分解主要在GPa的催化下進(jìn)行。
測(cè)定原理:
未添加激活劑時(shí),GPa催化糖原和無(wú)機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基**糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原**NADPH,在340nm下測(cè)定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
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特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)所需的全套試劑
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
耐冷類(lèi)諾卡氏菌鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)蛋白激酶2α抗體Human ERGIC1 ELISA Kit兔子白介素3(IL-3)試劑盒
紅屬周期蛋白結(jié)合蛋白抗體Human EPS15R ELISA Kit兔子白介素2(IL-2)試劑盒
球孢白僵菌分裂周期蛋白2抗體Human ERGIC2 ELISA Kit兔子白介素1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)試劑盒
酪丁酸梭菌DNA分裂周期調(diào)控蛋白45抗體Human ERBB3 ELISA Kit兔子白介素1β (IL-1β)試劑盒
橄欖產(chǎn)色鏈霉菌染色體相關(guān)蛋白H抗體Human ERBB4(Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4) ELISA Kit兔子白介素1α(IL-1α)試劑盒
簡(jiǎn)青霉中心體蛋白質(zhì)76抗體Human EPB41L2 ELISA Kit兔子白介素18(IL-18)試劑盒
Streptococcus sanguinis中心體蛋白152抗體Human ERC1 ELISA Kit兔子白介素13(IL-13)試劑盒
異常威克漢姆酵母酪蛋白激酶1γ2/casein kinase Iγ1抗體Human EPB41L3 ELISA Kit兔子白介素11(IL-11)試劑盒
山東糖多孢菌唇裂和腭裂相關(guān)跨膜蛋白1抗體Human EPHA6 ELISA Kit兔子白介素10(IL-10)試劑盒
水稻腸桿菌趨化素樣因子超家族成員8抗體Human EPHA7 ELISA Kit兔子白介素1(IL-1)試劑盒
擬康氏木霉趨化素樣因子超家族成員1抗體Human EPHX2 ELISA Kit兔子γ干擾素(IFN-γ)試劑盒
梭菌神經(jīng)蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN6抗體Human EPHA8 ELISA Kit兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)試劑盒
腦膜膿性金黃桿菌甘氨酸結(jié)合蛋白抗體Human EFNB1(Ephrin B1) ELISA Kit兔子β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)試劑盒
異常漢遜酵母異常變種多巴D1受體相互作用蛋白抗體Human EPN3 ELISA Kit兔子β4整合素(ITG β4/CD104)試劑盒
鏈格孢 蘋(píng)果專(zhuān)化型Capicua蛋白抗體Human EPRS ELISA Kit兔子α干擾素(IFN-α)試劑盒
釀酒酵母碳酸酐酶6抗體Human EPS15R ELISA Kit兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)試劑盒
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSyndecan-1/CD138試劑盒麥冬皂苷C
門(mén)多薩假單胞菌Pseudomonas│mendocina 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSWI/SNF相關(guān), 基質(zhì)關(guān)聯(lián),肌動(dòng)蛋白依賴(lài)染色質(zhì)調(diào)控因子,亞家族c,成員1試劑盒麥冬皂苷A
糙皮側(cè)耳(平菇)Pleurotus│ostreatus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSTEAP家族成員4試劑盒馬兜鈴內(nèi)酰
糖原磷酸化酶a(GPa)比色法檢測(cè)試劑盒100管/96樣NADPH氧化酶3(NOX3/MOX2)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):NOX3/MOX2 ,NOX3/MOX2,
E3泛素蛋白連接酶TRIM68(TRIM68)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):TRIM68 ,TRIM68,
CD15分子(CD15)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):CD15 ,CD15,
apelin 13(AP13)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):AP13 ,AP13,
8異前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):8-iso-PGF2a ,8-iso-PGF2a,
基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP25)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):MMP25 ,MMP25,
核黃素激酶(RFK)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):RFK ,RFK,
黃體**素(LH)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):LH ,LH,
骨橋素(OPN)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):OPN ,OPN,
高敏甲狀腺素(u-T4)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):u-T4 ,u-T4,
甘露糖(Mannose)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):Mannose ,Mannose,
肺炎衣原體抗原(Cpn)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):Cpn ,Cpn,
多效生長(zhǎng)因子(PTN)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):PTN ,PTN,
第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):FⅧAg ,F(xiàn)ⅧAg,
蛋白S(ProteinS)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):ProteinS ,ProteinS,
催產(chǎn)素受體(OXTR)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):OXTR ,OXTR,
皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):CORT ,CORT,
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
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