基本信息:
產(chǎn)品名稱(chēng):DH5α 含pBARGPE1質(zhì)粒 大腸桿菌說(shuō)明書(shū)
拉丁文:
Escherichia coli DH5α(pBARGPE1)
提供形式: 西林瓶,菌片
**等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: pBARGPE1質(zhì)粒提取。
培養(yǎng)基: LB抗性培養(yǎng)基,含50μg/mL氨芐青霉素鈉。
酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min**。 **結(jié)束,冷卻降溫后加入氨芐青霉素鈉,使培養(yǎng)基中氨芐青霉素鈉*終含量為50μg/mL。
生長(zhǎng)條件: 37℃ ,好氧
存儲(chǔ)條件:
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 0012
生長(zhǎng)條件 28℃
存儲(chǔ)條件 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
保藏方法:
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧**用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存???
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。
碎肉培養(yǎng)基 250g/瓶 用于**丙酸桿的培養(yǎng),不含維 生素 K,需添加 11002(庖肉牛肉 粒)特價(jià)供應(yīng)
TTC 溶液(0.125%) 特價(jià)供應(yīng) 2ml*10 添加于HB0127中
SIM培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 250 用于硫化氫、動(dòng)力、吲哚試驗(yàn)
一次性衛(wèi)生用品檢驗(yàn) 特價(jià)供應(yīng)
沙氏BHI瓊脂 特價(jià)供應(yīng) 250 用于真檢測(cè)(Acumedia 方法)
HC瓊脂基礎(chǔ) 特價(jià)供應(yīng) 250 用于化妝品中霉總數(shù)測(cè)定(Acumedia 方法)
青霉素敏感紙片 特價(jià)供應(yīng) 20片 炭疽桿檢測(cè)用配套試劑
外周髓鞘蛋白0(P0蛋白)多肽抗原 myelin P0 prothein( peripheral myelin prothein Zero;MPZ;MPP) 特價(jià)促銷(xiāo) 規(guī)格: 0.5mg
粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗原 Muc2 peptide 特價(jià)促銷(xiāo) 規(guī)格: 0.5mg
DH5α 含pBARGPE1質(zhì)粒 大腸桿菌說(shuō)明書(shū)FBRSL1 乙型肝炎X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白9抗體 0.2ml
ASTE1 ASTE1蛋白抗體 0.2ml
C12ORF40 12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框40抗體 0.2ml
CCL28/MEC 粘膜相關(guān)上皮趨化因子28抗體 0.1ml
Phospho-p56Dok2(Tyr142) 磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體 0.1ml
HIV p55+P6-Gag 艾滋病抗體 0.2ml
ABCF3 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白F亞基3抗體 0.2ml
FAM166A FAM166A蛋白抗體 0.2ml
LRRC15 富含亮氨酸重復(fù)蛋白15抗體 0.2ml
AE2/SLC4A2 陰離子交換蛋白2抗體 0.2ml
Caspase 2 半胱胺酸蛋白酶-2抗體 0.1ml
DRD2 多巴胺受體D2抗體 0.1ml
MRC1/CD206 巨噬細(xì)胞甘露糖受體抗體 0.2ml
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線(xiàn)菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
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