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小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)產(chǎn)生氣泡解讀
1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周?chē)?,?dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸。
2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一。
3.包被時(shí)有氣泡的話(huà),將導(dǎo)致包被不完全實(shí)際包被量下降--弱陽(yáng)性甚至假陰性。
4.封閉時(shí)有氣泡的話(huà),將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在,引起非特異性結(jié)合--本底增高,假陽(yáng)性。
5.加樣時(shí)有氣泡的話(huà),抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽(yáng)性甚至假陰性。
6.加二抗時(shí)有氣泡的話(huà),抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽(yáng)性甚至假陰性(競(jìng)爭(zhēng)法相反----假陽(yáng)性)。
7.加顯色液時(shí)有氣泡的話(huà)---顯色不完全。
8.加終止液時(shí)有氣泡的話(huà)(1、不能完全終止反應(yīng) 2、影響酶標(biāo)儀比色,OD值增高)
9.洗滌時(shí)有氣泡的話(huà),非特異性結(jié)合物不能完全洗去,做無(wú)用功。
避免方法:
1.加樣時(shí)盡量靠近孔底(不要接觸孔底),用力均勻,不要過(guò)快過(guò)猛。
2.封閉時(shí)一定要加滿(mǎn)孔,
3.洗滌時(shí)一定要加滿(mǎn)孔(重要),氣泡會(huì)浮上來(lái)*終驅(qū)除。手工洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。