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細胞轉(zhuǎn)染的途徑 轉(zhuǎn)染的途徑:轉(zhuǎn)染的途徑大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類:1.物理介導(dǎo):電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰毎姆独?.化學(xué)介導(dǎo):方法很多,如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù)。3.生物介導(dǎo):方法有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染,和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。理想細胞轉(zhuǎn)染方法,應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù),是目發(fā)布時間:2024-12-23 15:50 點擊次數(shù):5 次
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細胞培養(yǎng)實驗基本操作 細胞培養(yǎng)實驗基本操作:1、進無菌室前要洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。2、操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞發(fā)布時間:2024-12-16 11:48 點擊次數(shù):12 次
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胎牛血清制備過程的主要步驟 胎牛血清制備過程的主要步驟:1、采集胎牛血液制備胎牛血清的第1步是采集胎牛的血液。這需要在專業(yè)場所進行,確保采集的胎牛來自健康且受監(jiān)控的牧場。采集血液需要遵循倫理和動物福利的法規(guī)和標準。確保供體是5-8月齡的牛胚胎。2、血液分離采集的胎牛血液會經(jīng)過離心分離,將血漿與血細胞分開。血漿中包含了胎牛血清的大部分有利于細胞體外生長和繁殖的營養(yǎng)成分,如蛋白質(zhì)、生長因子和**。3、過濾和清理分離后的血漿會經(jīng)過發(fā)布時間:2024-12-09 11:00 點擊次數(shù):26 次
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雙抗夾心法實驗操作注意事項 雙抗夾心法實驗操作注意事項:1、樣品稀釋:(1)稀釋血清避免假陽性的發(fā)生(把蛋白按照一定的倍數(shù)稀釋,如10倍、20倍,將抗原進行稀釋包被反應(yīng);用稀釋好的陽性參閱血清和陰性參閱血清進行孵育后洗刷,加入酶結(jié)合物進行反應(yīng),孵育洗滌,加入底物顯色,停止反應(yīng)后分別測定O.D值,O.D值≥1.0的抗原稀釋度為適合的包被濃度。陰性參閱血清O.D值<0.1-0.2。這樣陽性參閱血清和陰性參閱血清的O.D值就會有明發(fā)布時間:2024-12-03 13:58 點擊次數(shù):37 次
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實驗室細胞復(fù)蘇具體過程 細胞復(fù)蘇是指將凍存在液氮里邊或者-80℃冰箱中的細胞解凍,再培養(yǎng)傳代。細胞復(fù)蘇應(yīng)采用快速融化的方法,這樣的目的是為了讓細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)融化,從而避免慢悠悠的融化,使得水分滲入細胞內(nèi)再結(jié)晶,從而對細胞再次造成傷害,從而影響細胞的存活率。細胞復(fù)蘇具體過程:1:細胞是凍在-80℃的環(huán)境里面的,所以拿出來后,應(yīng)該盡快去37℃水浴鍋里解凍(我一般是放在PE手套里面,然后在37攝氏度的水域上快速融化。發(fā)布時間:2024-11-26 15:06 點擊次數(shù):53 次
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大鼠4-羥基壬烯酸(HNE)ELISA試劑盒樣本收集處理 大鼠4-羥基壬烯酸(HNE)ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)**吸附實驗(ELISA).已知待測物質(zhì)濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將待測物質(zhì)和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。樣本收集處理:1.血清:室溫血液自然凝發(fā)布時間:2024-11-19 10:51 點擊次數(shù):62 次
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常見的五種生化試劑盒的原理及用途 五種常見生化試劑盒的原理及用途:1、多酚氧化酶(PPO)活性檢測試劑盒(比色法):多酚氧化酶(PPO)能夠催化Catechol產(chǎn)生醌,后者在525nm有特征光吸收,測定發(fā)布時間:2024-11-14 10:49 點擊次數(shù):65 次
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標準品與對照品的管理條例 標準品與對照品的管理條例:1.規(guī)范購入使用臺賬,嚴格表明購入時間、生產(chǎn)批號、來源、數(shù)量、使用期限等內(nèi)容;申購的標準品或?qū)φ掌返呐栆c新頒布標準品或?qū)φ掌放栂喾?.嚴格按照規(guī)定條件進行儲存,標準品或?qū)φ掌返男誀顦O不穩(wěn)定,對儲存條件和方式非??量?;3.規(guī)范管理和使用:(1)嚴格按照說明書要求,由于標準品或?qū)φ掌返牟环€(wěn)定性,若不安產(chǎn)品說明書的要求操作,極易造成較大的誤差,從而影響檢測結(jié)果;(2)稱發(fā)布時間:2024-11-06 10:42 點擊次數(shù):87 次
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PCR反應(yīng)被抑制或效率較低調(diào)整過程 PCR反應(yīng)被抑制或效率較低調(diào)整過程:一旦確定反應(yīng)被抑制或效率較低,則可采取一些步驟將效率值重新調(diào)整到理想范圍內(nèi)。1、對于抑制作用,可去除模板濃度高的反應(yīng)孔并重新分析標準曲線。如果效率重新回到110%以下,則分析良好。2、另一種解決方案是重新純化模板。切記應(yīng)延長干燥時間,以去除乙醇沉淀過程中的乙醇,或采用另外的柱上洗滌液將離液鹽從硅膠純化物中去除。3、通過分析優(yōu)化可解決效率低下的問題。此過程有時相對發(fā)布時間:2024-10-28 16:15 點擊次數(shù):107 次
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標準物質(zhì)使用管理說明 標準物質(zhì)一般是指一種確定了具有一個或多個足夠均勻的特性值的物質(zhì)或材料,作為分析測量行業(yè)中的“量具',在校準測量儀器和裝置、評價測量分析方法、測量物質(zhì)或材料特性值和考核分析人員的操作技術(shù)水平,以及在過程中產(chǎn)品的質(zhì)量控制等領(lǐng)域起著*的作用。企業(yè)或?qū)嶒炇覒?yīng)當建立標準物質(zhì)的科學(xué)管理制度,以保證標準物質(zhì)全流程的可追溯性、使信息傳遞正確有效,保證流轉(zhuǎn)過程數(shù)量和貯存準確、讓使用更規(guī)范與合理。一、標準物質(zhì)來源合發(fā)布時間:2024-10-23 17:01 點擊次數(shù):86 次
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ELISA實驗洗滌過程操作技巧小結(jié) 聚苯乙烯因其具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能而被廣泛用于ELISA實驗的固相載體,聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,因此需要通過洗滌**在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應(yīng)步驟,但卻決定著實驗的成敗。上述提到的血清中存在紅細胞或纖維蛋白原,可以在加樣前離心時得到控制,同樣也可以通過適當增加洗滌次數(shù)和浸泡時間減輕或避免對實驗結(jié)果的影響,同樣,對于血發(fā)布時間:2024-10-16 14:35 點擊次數(shù):117 次
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細胞培養(yǎng)操作 細胞培養(yǎng)操作:1)復(fù)蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000rpm條件下離心3min,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第2天換液并檢查細胞密度。2)細胞傳代發(fā)布時間:2024-10-12 16:08 點擊次數(shù):71 次
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檢測試劑盒保存方法 檢測試劑盒保存方法:1.檢測試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗刷液可能會有結(jié)晶分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響成果。3.各步加樣均應(yīng)運用加樣器,并常常校正其準確性,以防止試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,引薦運用排槍加樣。4.請每次測定的一起做規(guī)范曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高發(fā)布時間:2024-10-06 10:20 點擊次數(shù):98 次
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實時熒光定量PCR使用的熒光物質(zhì)原理簡述 實時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種:熒光探針和熒光染料?,F(xiàn)將其原理簡述如下:1.TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可發(fā)布時間:2024-09-30 10:15 點擊次數(shù):102 次
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從外觀和性能上篩選血清分析 在實際篩選時,主要從血清外觀和實驗操作時細胞的生長狀態(tài)進行。從外觀上:1.顏色:根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴謹規(guī)范程度。胎牛血清或多或少總有點溶血,因為胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂;2.澄清度:高質(zhì)量的胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡;3.血清沉淀:血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有影響,沉淀的發(fā)布時間:2024-09-23 10:23 點擊次數(shù):92 次