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第2年
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選擇合適一抗要點(diǎn) 選擇合適一抗要點(diǎn):1、確定抗體的名字,注意中英文名字、它名、亞型等信息。2、確定你的實(shí)驗(yàn)類型,Elisa,WB,IHC,ICC,還是FACS。一般抗體的說明書都會(huì)列出該抗體經(jīng)驗(yàn)證過適用于何種實(shí)驗(yàn)的類型,如果抗體說明書沒有提及的應(yīng)用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型,而僅是說明尚未經(jīng)過此種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,請(qǐng)根據(jù)說明書列出的已驗(yàn)證的類型來選擇適合你實(shí)驗(yàn)的抗體。3、確定實(shí)驗(yàn)樣本的種屬,Human,發(fā)布時(shí)間:2023-08-01 10:37 點(diǎn)擊次數(shù):167 次
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辨別胎牛血清的質(zhì)量外觀細(xì)節(jié) 胎牛血清(FetalBovineSerum)是在母牛懷孕5-8個(gè)月時(shí),通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。牛血清作為實(shí)驗(yàn)室廣泛推崇的天然培養(yǎng)被應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)。胎牛血清含有胚胎發(fā)育所必需的生長(zhǎng)因子。 胎牛血清因富含豐富的營(yíng)養(yǎng)還有細(xì)胞生成必須的成分所以大多時(shí)候用來培養(yǎng)干細(xì)胞等一些珍貴難養(yǎng)的細(xì)胞,某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),胎牛血清的珍貴導(dǎo)致它的價(jià)格也比其他的新生牛血清、小牛血清貴的多。所以學(xué)會(huì)如何辨別發(fā)布時(shí)間:2023-07-24 14:54 點(diǎn)擊次數(shù):159 次
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ELISA實(shí)驗(yàn)各項(xiàng)條件選擇 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:1、固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。2、包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在發(fā)布時(shí)間:2023-07-19 11:20 點(diǎn)擊次數(shù):128 次
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小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞操作要點(diǎn) 小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞操作要點(diǎn):1、將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。2、將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝發(fā)布時(shí)間:2023-07-11 10:35 點(diǎn)擊次數(shù):268 次
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標(biāo)準(zhǔn)品的管理規(guī)范 標(biāo)準(zhǔn)品的管理規(guī)范:一、接收發(fā)布時(shí)間:2023-07-05 13:00 點(diǎn)擊次數(shù):266 次
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ELISA包被的方式 將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用力。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。發(fā)布時(shí)間:2023-06-28 10:14 點(diǎn)擊次數(shù):121 次
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大鼠ELISA試劑盒特點(diǎn)優(yōu)勢(shì) 大鼠ELISA試劑盒特點(diǎn)優(yōu)勢(shì): 1.試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、an全性及經(jīng)濟(jì)性quan面評(píng)價(jià)。 2.靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的能力;2)為試劑對(duì)大量樣品中陽性檢出的能力。3.特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測(cè)物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測(cè)定結(jié)果升高,可能導(dǎo)致假陽性,所以交叉反應(yīng)是評(píng)價(jià)其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。4.精密度:ELISA試劑一般指其批發(fā)布時(shí)間:2023-06-14 10:44 點(diǎn)擊次數(shù):142 次
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ELISA樣本細(xì)胞提取液反復(fù)凍融方法 ELISA樣本細(xì)胞提取液反復(fù)凍融方法:1、吸出培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,用胰蛋白酶消化細(xì)胞,然后加入適量的培養(yǎng)基將培養(yǎng)板上的細(xì)胞沖洗干凈。懸浮細(xì)胞可以省略該步驟。2、將細(xì)胞懸浮液收集到離心管中,在2-8℃下以1000×g離心5分鐘,然后吸去培養(yǎng)基,用預(yù)冷PBS洗滌細(xì)胞3次。3、加入適量的預(yù)冷PBS(建議在使用前立即加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。在6孔培養(yǎng)板(約1×106個(gè)細(xì)胞)中,每個(gè)孔加入150-250μ發(fā)布時(shí)間:2023-06-06 10:41 點(diǎn)擊次數(shù):328 次
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ELISA 操作過程注意事項(xiàng) ELISA操作過程注意事項(xiàng):1、操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。2、正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。3、手工洗板加洗液時(shí)發(fā)布時(shí)間:2023-05-29 11:19 點(diǎn)擊次數(shù):179 次
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細(xì)胞培養(yǎng)血清中的主要作用事項(xiàng) 血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。在細(xì)胞培養(yǎng)中的主要作用事項(xiàng)如下:1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的ji素,特別是基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,還包括一些主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物;2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他ji素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力;3.血清中含有一些微量元素,有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬發(fā)布時(shí)間:2023-05-24 11:12 點(diǎn)擊次數(shù):164 次
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PCR引物純度和穩(wěn)定性 定制引物的標(biāo)準(zhǔn)純度對(duì)于大多數(shù)PCR應(yīng)用是足夠的。因脫鹽而除去的苯甲?;彤惗□;苌?,因此不會(huì)干擾PCR。部分應(yīng)用需要純化,以除去在合成過程中的任何非全長(zhǎng)序列。這些截?cái)嘈蛄械漠a(chǎn)生是因?yàn)镈NA合成化學(xué)的效率不是100%。這是個(gè)循環(huán)過程,在每個(gè)堿基加入時(shí)使用重復(fù)化學(xué)反應(yīng),使DNA從3'到5'合成。在任何一個(gè)循環(huán)都可能失敗。較長(zhǎng)的引物,尤其是大于50個(gè)堿基,截?cái)嘈蛄械谋壤艽螅赡苄枰兓? 引物產(chǎn)量發(fā)布時(shí)間:2023-05-16 11:48 點(diǎn)擊次數(shù):211 次
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抗原抗體反應(yīng)的主要四個(gè)特性 抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)主要有四性:即特異性、比例性、可逆性,階段性。特異性:是抗原抗體反應(yīng)的zui主要特征,這種特異性是由抗原決定簇和抗體分子的超變區(qū)之間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性確定的。這種高度的特異性在傳染病的診斷與防治方面得到有效的應(yīng)用。隨著免yi學(xué)技術(shù)的發(fā)展進(jìn)步,還將在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域得到更加深入和廣泛的應(yīng)用,比如腫瘤的診斷和特異性zhi療等。比例性:是指抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系,只有發(fā)布時(shí)間:2023-05-10 13:20 點(diǎn)擊次數(shù):228 次
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化學(xué)試劑儲(chǔ)存應(yīng)防變質(zhì)事項(xiàng) 化學(xué)試劑儲(chǔ)存應(yīng)防變質(zhì)事項(xiàng):1.防氧化:亞硫酸鈉、硫酸亞鐵、硫代硫酸鈉均易被氧化,瓶口應(yīng)涂臘。2.防碳酸化:硅酸鈉、過氧化鈉、苛性堿均易吸收二氧化碳,應(yīng)該涂臘。3.防風(fēng)化:晶體碳酸鈉、晶體硫酸銅應(yīng)進(jìn)行臘封,存放在地下室中。4.防分解:碳酸氫銨、濃硝酸受熱易分解,涂臘后,存放在地下室中。5.活性炭能吸附多種氣體而變質(zhì),(木炭亦同),應(yīng)放在干燥器中。6.黃磷遇空氣易自燃,永遠(yuǎn)保存水中,每15天查水一次:發(fā)布時(shí)間:2023-05-05 13:33 點(diǎn)擊次數(shù):197 次
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動(dòng)物植物細(xì)胞培養(yǎng)所需條件 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)在所有的細(xì)胞離體培養(yǎng)中,zui困難的是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下面是它所需要的特殊條件。⑴血清:動(dòng)物細(xì)胞離體培養(yǎng)常常需要血清。常見的是小牛血清。血清提供生長(zhǎng)必需因子,如激su、微量元素、礦物質(zhì)和脂肪。在這里,血清等于是動(dòng)物細(xì)胞離體培養(yǎng)的天然營(yíng)養(yǎng)液。⑵支持物:大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞有貼壁生長(zhǎng)的習(xí)慣。離體培養(yǎng)常用玻璃,塑料等作為支持物。⑶氣體交換:二氧化碳和氧氣的比例要在細(xì)胞培養(yǎng)過程中不斷進(jìn)行調(diào)節(jié),不斷發(fā)布時(shí)間:2023-04-24 10:45 點(diǎn)擊次數(shù):233 次
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ELISA三種結(jié)果判定方法 1.定性測(cè)定(1)ELISA試劑盒陽性判定值法(cut-offvalue,CO值):一般為陰性對(duì)照的平均A值加一個(gè)常數(shù),試劑制備嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化,要先計(jì)算出陽性對(duì)照A值平均數(shù)和陰性對(duì)照A值平均數(shù)。標(biāo)本A值≥CO值即為陽性。(2)抑制率法:在競(jìng)爭(zhēng)抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。抑制率(%)=(A陰性對(duì)照A-A待測(cè))/陰性對(duì)照X100%,一般以抑制率≥50%為陽性試劑盒。2.半定量測(cè)定 結(jié)果一般以滴度表示。將標(biāo)發(fā)布時(shí)間:2023-04-21 15:17 點(diǎn)擊次數(shù):2135 次