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產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：小鼠神經(jīng)干細(xì)胞；NE-4C

  • 產(chǎn)品型號(hào)：P-X10499
  • 產(chǎn)品**：派瑞曼
  • 產(chǎn)品價(jià)格：0
  • 折扣價(jià)格：0
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡(jiǎn)單介紹：
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞；NE-4C公司正在出售的產(chǎn)品：LNCaP clone FGC（人前列腺癌細(xì)胞） NRK（大鼠腎細(xì)胞） 鋅指蛋白Zdhhc18抗體 Anti-ZDHHC-18 組蛋白連接作用蛋白抗體 SHPRH
詳情介紹：

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞；NE-4C

英文簡(jiǎn)稱

規(guī)格

貨號(hào)

NE-4C

1×106

P-X10499

產(chǎn)品詳情：

細(xì)胞別稱；小鼠神經(jīng)干細(xì)胞；NE-4C

種屬來源；小鼠

年齡性別；胚胎

組織來源；腦，神經(jīng)外胚層

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

背景簡(jiǎn)介；NE-4C細(xì)胞來源于p53基因敲除的第9天小鼠胚胎的腦泡。據(jù)報(bào)道視黃酸可誘導(dǎo)NE-4C細(xì)胞系分化為神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞。

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

保藏機(jī)構(gòu)；中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)

倍增時(shí)間；~12小時(shí)

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

生物等級(jí)；1

支原體檢測(cè)；無

培養(yǎng)基；MEM+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例：
1、細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實(shí)驗(yàn)原理：

實(shí)驗(yàn)步驟：

1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上，利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板，轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。

公司正在出售的產(chǎn)品：

細(xì)胞糖原高碘酸希爾（PAS）法染色試劑盒

12（FACTOR XIIa）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

鹿尿酸氧化酶elisa生化檢測(cè)試劑盒

鹿環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa生化檢測(cè)試劑盒

抗體孵育膜 100張/包

2號(hào)染色體開放閱讀框25抗體

小鼠核轉(zhuǎn)錄因子kBP65(NFkBP65)elisa生化檢測(cè)試劑盒

mucolipin 3

cGMP ELISA Kit

粘脂蛋白3抗體

人蛋白酶3(PR3)elisa生化檢測(cè)試劑盒

一氧化氮合成酶（NOS）檢測(cè)試劑盒50T

HumanPR3ELISAKit

大鼠髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)elisa檢測(cè)試劑盒

P1噬菌體培養(yǎng)試劑盒

C2ORF25

辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗牛IgM

轉(zhuǎn)錄因子DP3抗體（相關(guān)抗原661）  Anti-TFDP3

Rabbit Anti-Bovine IgM / HRP

Ras蛋白腦組織同源類似物RHEB蛋白抗體  Anti-RHEB

神經(jīng)叢蛋白A4抗體

神經(jīng)絲蛋白抗體  Anti-Neuronal thread protein AD7c-NTP

Plexin A4

磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體  Anti-Phospho-Stat2 (Tyr690)

人α1防御素(DEFA1)elisa生化檢測(cè)試劑盒

豬Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)elisa生化檢測(cè)試劑盒

HumanDEFA1ELISAkit

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞；NE-4CPⅢNPELISAKit

大鼠多肽YY/酪酪肽(PYY)elisa生化檢測(cè)試劑盒

山羊促生長(zhǎng)釋放(GHRH)elisa生化檢測(cè)試劑盒

PYY ELISA Kit

GHRHELISAKit


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