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產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：L929小鼠成纖維細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號：P-X1069
  • 產(chǎn)品**：派瑞曼
  • 產(chǎn)品價格：0
  • 折扣價格：0
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簡單介紹：
L929小鼠成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：3T3-L1小鼠胚胎成纖維細(xì)胞貼壁細(xì)胞成纖維細(xì)胞樣3T3-L1:3T3L1小鼠細(xì)胞系組織來源：胚胎小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)elisa檢測試劑盒大鼠前列環(huán)素(PGI2)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
詳情介紹：

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。

L929小鼠成纖維細(xì)胞

英文簡稱

規(guī)格

貨號

L929:L929

1×106

P-X1069

產(chǎn)品詳情：

細(xì)胞別稱：NCTC 929; NCTC-929; L cell; L cells; L-cell; L-cells; L cell line; L; 種屬ain L-929; L-929; L 929; L929; L929(NCTC); Clone 929; Earles's cells; Earle's L cells

種屬來源：小鼠

年齡性別：雄；100日齡

組織來源：皮下結(jié)締組織

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

背景簡介：1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠結(jié)締組織)，細(xì)胞系L的克隆。細(xì)胞系L是早建立的連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞系之一，而clone 929是早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細(xì)胞系L。 第95代的細(xì)胞系L使用毛細(xì)管法分離單細(xì)胞建立了clone929。檢測發(fā)現(xiàn)鼠痘病毒陰性。

生物等級：1

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達(dá)情況：

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CCL-1 ATCC; CRL-6364 BCRC; 60091 BCRJ; 0188 DSMZ; ACC-2 ECACC; 85011425 ECACC; 85103115 ECACC; 88102702

培養(yǎng)基：90%MEM+10%FBS+PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

倍增時間：~28-36 hours

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。


一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例：
1、細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實驗原理：

公司正在出售的產(chǎn)品：

植物茄呢醇磷酸酶1(SPS1/SPPS/SPS)elisa分析檢測試劑盒

趨化因子結(jié)合蛋白2抗體 CCBP2

SPS1/SPPS/SPS ELISA kit

造血干細(xì)胞抗原CD133相關(guān)蛋白抗體 Prominin 2

人促睡眠肽(DSIP)elisa分析檢測試劑盒

kappa型受體抗體 kappa Opioid receptor

DSIPELISAKit

Histone H3.3重組兔單克隆抗體 Histone H3.3

整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體 CD11b

熱休克因子結(jié)合蛋白1樣蛋白1抗體 HSBP1L1

富含亮氨酸重復(fù)蛋白6抗體 LRRC6

細(xì)胞衰老抑制基因抗體 RSL1D1

鈣粘蛋白14抗體 FAT4

T細(xì)胞調(diào)控相關(guān)蛋白抗體 CRTAM

細(xì)胞角蛋白75抗體 KRT75

α1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體 A4GNT

茶葉維生素U（S-Methylmethionine）比色法定量檢測試劑盒

APC-Cy7標(biāo)記小鼠CD62L單克隆抗體 mouse CD62L/APC-Cy7

人球蛋白M（IgM）elisa檢測試劑盒

ATP依賴RNA解旋酶DDX42抗體 DDX42

大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa檢測試劑盒

凱爾血型糖蛋白CD238抗體 CD238

豬環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測

老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS2抗體 CLSTN2

小鼠白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制因子(LEI)elisa檢測試劑盒

COLLAGEN II蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

大鼠Ⅴ型膠原(Col Ⅴ)elisa檢測試劑盒

L929小鼠成纖維細(xì)胞人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)elisa分析檢測試劑盒

大鼠胰高血糖素樣肽1(GLP1)elisa檢測試劑盒

膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T

細(xì)胞樣品氧化酶表達(dá)組織化學(xué)檢測試劑盒

細(xì)胞可溶性總核蛋白制備試劑盒

實驗步驟：

1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上，利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板，轉(zhuǎn)染時細(xì)胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。


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