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英文簡(jiǎn)稱
規(guī)格
貨號(hào)
beas-2b:beas2b
1×106
P-X662
產(chǎn)品詳情:
細(xì)胞別稱:Beas-2B; BEAS 2B; BEAS2B; Beas2B; Bronchial Epithelium transformed
with Ad12-SV40 2B;人支氣管上皮樣細(xì)胞;人支氣管上皮樣細(xì)胞
種屬來(lái)源:人
年齡性別:
組織來(lái)源:肺;支氣管;正常;上皮;病毒轉(zhuǎn)化
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
背景簡(jiǎn)介:BEAS-2B細(xì)胞是從一位非癌個(gè)體的正常人支氣管上皮病理切片分離出的上皮細(xì)胞。這些細(xì)胞用腺病毒12-SV40病毒雜交病毒感染并克隆,BEAS-2B細(xì)胞保留了對(duì)血清反應(yīng)進(jìn)行鱗關(guān)分化的能力,并有用于篩選誘導(dǎo)或影響分化及致癌的化學(xué)或生物制劑。BEAS-2B細(xì)胞角蛋白及SV40抗原染色陽(yáng)性。
生物等級(jí):2
細(xì)胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè):無(wú)
基因表達(dá)情況:
保藏機(jī)構(gòu):ATCC; CRL-9609 ECACC; 95102433
培養(yǎng)基:90%MEM+10%FBS+PS
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
倍增時(shí)間:
STR鑒定位點(diǎn)Amelogenin:X, Y;D8S1179:13, 15;D21S1128, 30;D7S820:10, 13;CSF1PO:9, 12;D3S1358:15, 17;TH01:7, 9.3;D13S317:13;D16S539:12;D2S1338:22, 23;D19S433:13.2, 15.2;vWA:17, 18;THOX:6, 11;D18S51:18, 19;D5S818:12, 13;FGA:20, 24。
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細(xì)胞處理:
1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇::將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過(guò)夜
。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:1、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例:
1、細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來(lái)決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過(guò)夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
實(shí)驗(yàn)原理:
實(shí)驗(yàn)步驟:
1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上,利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板,轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞,并置于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基,并繼續(xù)培養(yǎng);
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開(kāi)始加藥篩選培養(yǎng),直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%,獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IL-2誘導(dǎo)型T細(xì)胞激酶抗體 |
胰島細(xì)胞自身抗原1抗體 |
ITK |
小鼠CD83分子(CD83)elisa檢測(cè)試劑盒 |
脂肪細(xì)胞膜相關(guān)蛋白抗體 |
AFF4 |
APMAP |
細(xì)胞相關(guān)AF4樣蛋白抗體 |
體外加帽RNA轉(zhuǎn)錄合成試劑盒 |
ICA1 |
AKT蛋白共沉淀分析試劑盒 |
PHC1 |
脫氫抗壞血酸(DHA)含量測(cè)試盒 |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體 |
早期發(fā)育調(diào)控蛋白1/EDR1抗體 |
CCDC28A |
PE-CY5標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG H&L |
甲狀腺反應(yīng)蛋白抗體 Anti-THRSP |
Donkey Anti-Guinea Pig IgG H&L / PE-Cy5 |
三磷酸腺苷受體P2X6抗體 Anti-P2RX6 |
微管聚合促進(jìn)蛋白3抗體 |
原鈣粘蛋白12抗體 Anti-PCDHA12 |
TPPP3 |
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SRPK1抗體 Anti-SRPK1 |
人11-脫氧皮質(zhì)醇elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
小鼠降鈣素(CT)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
Human11-DeoxycortisolELISAKit |
beas-2b人支氣管上皮細(xì)胞CTELISAKit |
大鼠26S蛋白酶體(26S PSM)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
人鈣調(diào)磷酸酶(CaN)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
26S PSM ELISA Kit |
CaNELISAKit |