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生化試劑盒是否適合實(shí)驗(yàn)使用參考要素
驗(yàn)證生化試劑盒
是否適合使用參考要素:
一、試劑空白吸光度
用蒸餾水做空白,用指定的空白液加入試劑作為樣品測試,在測試主波長下,記錄測試啟動時的吸光度
(A1)
和約
5
分鐘后的吸光度
(A2)
,
A2
測試結(jié)果即為試劑空白吸光度測定值,應(yīng)符合**企業(yè)給定范圍。這是判定試劑質(zhì)量的一個有效指標(biāo)。
二、試劑空白變化速率
對于速率法試劑盒,用指定的空白液加入試劑作為樣品測試時,在測試主波長下,記錄測試啟動時的吸光度
(A1)
和約
5
分鐘
(T)
后的吸光度
(A2)
,計(jì)算試劑空白吸光度變化率
(DA/min)
,應(yīng)不超過**企業(yè)給定值。測定試劑空白吸光度變化
(
Δ
A/min)
,用來檢查試劑在工作狀態(tài)下的穩(wěn)定性。但事實(shí)上,試劑空白吸光度變化速率無法反映試劑盒的穩(wěn)定性,試劑空白吸光度變化速率主要反映干擾程度和儀器的穩(wěn)定性。
三、分析靈敏度
用吸光度差值
(
Δ
A)
或吸光度變化
(
Δ
A/min)
來表示單位濃度的被測物反應(yīng)所引起的信號變化,其含義類似摩爾消光系數(shù),應(yīng)符合**企業(yè)給定范圍。需要注意的是,分析靈敏度不是越高越好,以適合待測物檢測范圍為原則。分析靈敏度一般用于批間比較,較能反映**商的配方、原料的一致性。
四、線性范圍
取高濃度樣品和低濃度樣品按不同比例混合成
5
個濃度做線性試驗(yàn)。線性范圍內(nèi)的分析性能應(yīng)符合如下要求:①線性性相關(guān)系數(shù)
r
應(yīng)≥
0.990;
②線性偏差應(yīng)不超過**企業(yè)給定值。試劑
(
盒
)
的線性范圍越寬,臨床復(fù)測幾率越小,但與樣品
/
試劑比例成反比。
五、重復(fù)性
1.
批內(nèi)重復(fù)性 在重復(fù)性條件下,用高、中、低三個水平濃度
(
高、低濃度應(yīng)超過參考區(qū)間
20%
~
30%
,中濃度水平在參考區(qū)間之內(nèi)
)
的控制血清或新鮮人血清測試試劑,重復(fù)測試至少
10
次。
2.
批間重復(fù)性 用質(zhì)量控制血清測試
3
×
3(3
個批號,每個批號取
3
瓶
)
批間差,較能反映**商的配方、原料的一致性。干粉或凍干試劑還需測定批內(nèi)瓶間差,測定同一批號的試劑
20
瓶,用變異系數(shù)
(CV)
來表示。變異系數(shù)
(CV)
不超過**企業(yè)給定值。
六、準(zhǔn)確度
1.
相對偏差 直接用試劑盒測定參考物質(zhì)
(
平行
3
次
)
,評價測定均值與靶值的偏離程度。也可用由參考方法定值的高、中、低三個濃度的人混合血清,用試劑盒平行測定
3
次,計(jì)算均值與定值的相對偏差。
2.
比對試驗(yàn) 既無參考物質(zhì)、參考血清,也無標(biāo)準(zhǔn)品,也可用比對試驗(yàn)來驗(yàn)證準(zhǔn)確度。
七、校準(zhǔn)品溯源、質(zhì)控品賦值
1.
校準(zhǔn)品溯源性 根據(jù)
GB/T21415
及有關(guān)規(guī)定提供校準(zhǔn)品的來源、賦值過程及測量不確定度等內(nèi)容,明確溯源途徑。
2.
質(zhì)控品賦值有效性 質(zhì)控品的測定結(jié)果應(yīng)在試劑盒規(guī)定的范圍內(nèi)。
八、穩(wěn)定性
1.
效期穩(wěn)定性 取已到效期的試劑盒按以上評價方法對試劑盒性能指標(biāo)進(jìn)行評價。
2.
熱穩(wěn)定性試驗(yàn) 生化試劑盒一般置
2-8
℃保存,為了快速有效地評價試劑盒的穩(wěn)定性,可以用加速試驗(yàn)來估計(jì)。
3.
開瓶穩(wěn)定性 干粉試劑開瓶后
(
復(fù)溶后
)
在規(guī)定的儲存條件下保存至預(yù)期時間內(nèi),產(chǎn)品的性能至少應(yīng)符合線性和準(zhǔn)確度的要求。
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