產(chǎn)品描???:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。該細胞只可用于科研。
產(chǎn)品名稱
|
人肺大靜脈平滑肌細胞保存
|
規(guī)格
|
5×105
|
貨號
|
BJ-X63354
|
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細胞懸浮生長。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM
EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
鹽酸布比卡因(標(biāo)準(zhǔn)品) Bupivacaine HCl 質(zhì)量規(guī)格:標(biāo)準(zhǔn)品,用于含量測定 大鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA檢測試劑盒RatE-SelectinELISAkit
96T/48T
鹽酸布替萘芬 Butenafine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,JP16 大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA檢測試劑盒RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit
96T/48T
卡托普利 Captopril 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP34,BR,可用于細胞培養(yǎng) 大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA檢測試劑盒RatFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit
96T/48T
卡托普利(標(biāo)準(zhǔn)品) Captopril 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA檢測試劑盒RatL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit
96T/48T
卡比多巴 (S)-Carbidopa 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng),一水合物 大鼠N端前腦素(-proBNP)ELISA檢測試劑盒RatN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT
96T/48T
卡比多巴(標(biāo)準(zhǔn)品)
(S)-Carbidopa 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測試劑盒RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit
96T/48T
醋酸氯地孕酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Chlormadinone
Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠N-乙?;?span>-
絲氨酰
-天門冬酰
-賴氨酰
-脯氨酸
(AcSDKP)ELISA檢測試劑盒
RatN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit
96T/48T
醋酸氯地孕酮 Chlormadinone
Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98% 大鼠p16基因甲基化檢測試劑盒20
鹽酸環(huán)丙沙星 Ciprofloxacin
HCL 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP34,BR,可用于細胞培養(yǎng) 大鼠PDGFβ基因甲基化檢測試劑盒20
鹽酸環(huán)丙沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Ciprofloxacin
HCL 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠PGES基因甲基化檢測試劑盒20
大鼠ERβ基因甲基化檢測試劑盒20 鹽酸布比卡因 Bupivacaine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>95%,USP
大鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA檢測試劑盒RatE-Selectin 96T/48T 鹽酸布比卡因(標(biāo)準(zhǔn)品) Bupivacaine HCl 質(zhì)量規(guī)格:標(biāo)準(zhǔn)品,用于含量測定
大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA檢測試劑盒RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3
96T/48T 鹽酸布替萘芬 Butenafine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,JP16
大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA檢測試劑盒RatFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3L
96T/48T 卡托普利 Captopril 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP34,BR,可用于細胞培養(yǎng)
大鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA檢測試劑盒RatL-Phenylalanineammonla-lyase,PAL
96T/48T 卡托普利(標(biāo)準(zhǔn)品) Captopril 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠N端前腦素(-proBNP)ELISA檢測試劑盒RatN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNP
96T/48T 卡比多巴 (S)-Carbidopa 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng),一水合物
大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測試劑盒RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG
96T/48T 卡比多巴(標(biāo)準(zhǔn)品)
(S)-Carbidopa 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA檢測試劑盒RatN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP
96T/48T 醋酸氯地孕酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Chlormadinone
Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠p16基因甲基化檢測試劑盒20 醋酸氯地孕酮 Chlormadinone Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%
大鼠PDGFβ基因甲基化檢測試劑盒20 鹽酸環(huán)丙沙星 Ciprofloxacin HCL 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP34,BR,可用于細胞培養(yǎng)
SCC-10A:頭頸部鱗癌細胞實驗 規(guī)格T25m2
SGC-7901:胃癌細胞說明書 規(guī)格T25m2
SHG-44:膠質(zhì)瘤細胞培養(yǎng) 規(guī)格T25m2
人肺大靜脈平滑肌細胞保存注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精(建議配置75%的酒精的水是過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
- 溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
- 免責(zé)申明:以上內(nèi)容為注冊會員自行發(fā)布,若信息的真實性、合法性存在爭議,平臺將會監(jiān)督協(xié)助處理,歡迎舉報