實驗要點及說明:
1.產(chǎn)品名稱本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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大鼠主動脈平滑肌細胞培養(yǎng)
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5×105
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BJ-X63519
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產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研。
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
石英砂(AR,6-10目或2-3mm) Sand 質(zhì)量規(guī)格:AR,6-10目或2-3mm 犬胰腺甘油三酯脂酶(PNLIP)試劑盒 Dog Pancreatic
iacylglycerol lipase,PNLIP ELISA kit
石英砂(AR,8-16目或1-2mm)
Sand 質(zhì)量規(guī)格:AR,8-16目或1-2mm 犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測試劑盒Canineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit
96T/48T
二氫銨(SP) Ammonium
phosphate monobasic 質(zhì)量規(guī)格:SP 犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)試劑盒 Canine
acetylcholine receptor aibody,AChRab ELISA Kit
二甲基亞砜(光譜級,>99.9% (GC))
Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:光譜級,>99.9% (GC) 犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA檢測試劑盒CaninehepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAgELISAKit
96T/48T
N,N-二甲基乙酰胺(光譜級,≥99.8%(GC)) N-N-Dimethylacetamide 質(zhì)量規(guī)格:光譜級,≥99.8%(GC) 犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)試劑盒 Canine hepatitis
B virus surface aigen,HBsAg ELISA Kit
二甲基亞砜(ACS,光譜級) Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:ACS,光譜級 犬抑制素β-B(Inhbb)試劑盒 Canine inhibin
beta-B,Inhbb ELISA Kit
乙二醇(光譜 ,≥99%) Ethylene
glycol 質(zhì)量規(guī)格:光譜 ,≥99% 犬游離甲狀腺素(FT4)試劑盒 Canine Free
Thyroxine,FT4 ELISA Kit
甘油(for spectroscopy,≥99.5%) Glycerol
in water for HPLC verification 質(zhì)量規(guī)格:for spectroscopy,≥99.5% 犬游離狀腺原氨酸(Free-T3)試劑盒 Canine Free
i-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit
碳酸鋰(SP) Lithium carbonate 質(zhì)量規(guī)格:SP 犬游離脂肪酸(FFA)試劑盒 Dog free fatty
acids,FFA ELISA kit
新亞銅試劑鹽酸鹽一水合物(99%)
Neocuproine monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:0.99 犬誘導型合成酶(iNOS)試劑盒 Dog inducible
niic oxide syhase,iNOS ELISA Kit
犬胰高血糖素樣肽1(GLP1)試劑盒 Dog glucagon
like peptide 1,GLP1 ELISA Kit 二氧化硅(99.99%,1-3mm) Silicon dioxide 質(zhì)量規(guī)格:99.99%,1-3mm
犬胰腺甘油三酯脂酶(PNLIP)試劑盒 Dog Pancreatic
iacylglycerol lipase,PNLIP ELISA kit 石英砂(AR,6-10目或2-3mm) Sand 質(zhì)量規(guī)格:AR,6-10目或2-3mm
犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測試劑盒Canineacetylcholinereceptoraibody,AChRab
96T/48T 石英砂(AR,8-16目或1-2mm) Sand 質(zhì)量規(guī)格:AR,8-16目或1-2mm
犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)試劑盒 Canine acetylcholine
receptor aibody,AChRab ELISA Kit 二氫銨(SP) Ammonium phosphate monobasic 質(zhì)量規(guī)格:SP
犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA檢測試劑盒CaninehepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAg
96T/48T 二甲基亞砜(光譜級,>99.9% (GC))
Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:光譜級,>99.9% (GC)
犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)試劑盒 Canine hepatitis B virus
surface aigen,HBsAg ELISA Kit N,N-二甲基乙酰胺(光譜級,≥99.8%(GC)) N-N-Dimethylacetamide 質(zhì)量規(guī)格:光譜級,≥99.8%(GC)
犬抑制素β-B(Inhbb)試劑盒 Canine inhibin beta-B,Inhbb
ELISA Kit 二甲基亞砜(ACS,光譜級) Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:ACS,光譜級
犬游離甲狀腺素(FT4)試劑盒 Canine Free Thyroxine,FT4
ELISA Kit 乙二醇(光譜 ,≥99%) Ethylene
glycol 質(zhì)量規(guī)格:光譜 ,≥99%
犬游離狀腺原氨酸(Free-T3)試劑盒 Canine Free i-iodothyronine
Indes,Free-T3 ELISA Kit 甘油(for spectroscopy,≥99.5%) Glycerol
in water for HPLC verification 質(zhì)量規(guī)格:for spectroscopy,≥99.5%
犬游離脂肪酸(FFA)試劑盒 Dog free fatty acids,FFA
ELISA kit 碳酸鋰(SP) Lithium
carbonate 質(zhì)量規(guī)格:SP
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