步：認(rèn)識(shí)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中有哪些污染？

細(xì)胞培養(yǎng)污染是指培養(yǎng)環(huán)境中侵入了對(duì)細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞變異的異物。體外細(xì)胞培養(yǎng)污染可分為三類：物理性、化學(xué)性及生物性污染。

物理性污染：物理性污染通過(guò)影響細(xì)胞培養(yǎng)體系中的生化成分，從而影響細(xì)胞的代謝。

物理性污染的來(lái)源：培養(yǎng)環(huán)境中的物理因素，如溫度、放射線、振動(dòng)、輻射（紫外線或熒光）會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生影響。

物理性污染的現(xiàn)象：細(xì)胞、培養(yǎng)液或其他培養(yǎng)試劑暴露在放射線、輻射或過(guò)冷過(guò)熱的溫度中，可以引起細(xì)胞代謝發(fā)生改變，如細(xì)胞同步化、細(xì)胞生長(zhǎng)受抑制，甚至細(xì)胞死亡。

化學(xué)性污染:化學(xué)性污染是一些對(duì)細(xì)胞有毒性的或?qū)?xì)胞產(chǎn)生刺激的化學(xué)物質(zhì)。

化學(xué)性污染的來(lái)源：

未純化的物質(zhì)、試劑、水、血清、生長(zhǎng)輔助因子及儲(chǔ)存試劑的容器都可能成為化學(xué)性污染的來(lái)源。細(xì)胞培養(yǎng)的必需養(yǎng)分（如氨基酸）若濃度超過(guò)了合理的范圍，也會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性。同樣，不同細(xì)胞系在佳培養(yǎng)條件下對(duì)血清和緩沖液的要**不一樣的，在培養(yǎng)中應(yīng)嚴(yán)格控制。

化學(xué)性污染的現(xiàn)象：化學(xué)性污染同樣會(huì)使細(xì)胞生長(zhǎng)受抑制，甚至細(xì)胞死亡。

生物污染

生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的**、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。

生物性污染的來(lái)源：取材不慎或處理不當(dāng)、空氣塵埃、**不嚴(yán)、操作不當(dāng)、試劑尤其是血清污染

生物性污染的現(xiàn)象：**：G+菌較多、**：霉菌較多、支原體：不易檢測(cè)。病毒：由于病毒有種屬特異性，所以病毒污染的概率比較小。

**步：做好預(yù)防污染措施

針對(duì)細(xì)胞污染的三個(gè)分類，做好如下預(yù)防措施：

A.物理性污染的預(yù)防

B.化學(xué)性污染的預(yù)防

C.生物性污染的預(yù)防

預(yù)防是防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)生污染的較好辦法。只有提前做好預(yù)防工作，才能將發(fā)生污染的可能性降到較小程度。

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