培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
產(chǎn)品名稱:Top10大腸桿菌克隆菌株保存
拉丁文: Escherichia coli Top10
提供形式: 西林瓶,菌片
**等級(jí): 1
模式菌株: 未知
應(yīng)用領(lǐng)域: 用于基因克隆,可用于構(gòu)建克隆,藍(lán)白斑篩選等實(shí)驗(yàn),具有鏈霉素抗性
培養(yǎng)基: LB
酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min**。
生長(zhǎng)條件: 37℃,有氧,LB
存儲(chǔ)條件: -20℃避光保存;運(yùn)輸條件:常溫運(yùn)輸。
保藏方法:
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧**用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法產(chǎn)品僅用于科研
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。
使用說(shuō)明書(shū):
復(fù)蘇菌種前需先準(zhǔn)備好適用于該菌生長(zhǎng)的固體、液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備,以形成無(wú)菌的操作環(huán)境。
開(kāi)啟之前,先用75%酒精棉試管表面,按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)瓶蓋和膠塞,加入0.3ml左右的配套液體培養(yǎng)基,用無(wú)菌滴管反復(fù)吹吸,將凍干菌種溶解為懸液,然后用無(wú)菌滴管或接種環(huán)移至斜面、平板或液體培養(yǎng)基,并連同剩余菌懸液的試管一起放置于36℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
次日觀察菌種的生長(zhǎng)情況,如未生長(zhǎng),應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)24h,或吸取培養(yǎng)之后的試管剩余菌懸液再次接種培養(yǎng),培養(yǎng)24小時(shí)觀察。
菌株為一次性使用品,暫不開(kāi)啟的菌種應(yīng)在4℃環(huán)境下保存。
復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代以后使用,建議菌種使用5代后棄用。
綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
前期準(zhǔn)備:(A)處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
按比例配制培養(yǎng)材料;
導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
Top10大腸桿菌克隆菌株保存分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
網(wǎng)孢正青霉 Eupenicillium reticulisporum
彎曲假單胞菌 Pseudomonus geniculata
瓦克青霉 Penicillium waksmanii
唾液乳桿菌水楊素亞種 Lactobacillus salivarius subsp. salicinius
腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)
CCL2 Others Mouse 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A4
敘利亞倉(cāng)鼠細(xì)胞系;Syrian Hamster AV12 胃癌細(xì)胞,MFC細(xì)胞 EPC細(xì)胞,大黃魚(yú)EPC細(xì)胞
SV40T轉(zhuǎn)化的胚腎細(xì)胞(亞系);293T/17
CADM3 Others Mouse 小鼠 CADM3 / IGSF4B / NECL1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
DEPC
ml/ml/0ml1-Methyl-aminoH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35433
D-Fructose D-果糖 0g
1-Methyl-nitrophthalate2164
D-Glucose D-葡萄糖 0g 1-Indanone833
DIECA **酸合成途徑抑制劑 5g 1-Indanamine 324573
Digitonin 洋地黃皂苷 0mg 1-Hydroxy-methylanthraquinone6268/9/31-羥基-甲基蒽醌
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:TIMP2, CSC-21K Human TIMP-2(Tissue Inhibitors of
Metalloproteinase 2) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組TIMP-2濃度
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