產(chǎn)品名稱：BL21 DE3 大腸桿菌培養(yǎng)

拉丁文: Escherichia coli BL21(DE3)

提供形式: 西林瓶，菌片

**等級(jí): 1

模式菌株: 未知

應(yīng)用領(lǐng)域: 用于蛋白表達(dá)

培養(yǎng)基: LB瓊脂培養(yǎng)基:酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃，15min**。

生長(zhǎng)條件: 37℃，有氧，LB

儀器設(shè)備與器具：

1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。

2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。

3 接種針。

4 顯微鏡。

5 超凈工作臺(tái)。

6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。

7 天平：感量0.01g。

8 釜。

9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘。

10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片

①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長(zhǎng)期保存。

脫水存法：

①沙土保存法，能產(chǎn)孢子、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合，經(jīng)稀酸處理洗凈過(guò)篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;2～3次，烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好的孢子，用無(wú)菌蒸餾水2～2.5ml制成孢子懸液，吸取少許加入沙土管中，經(jīng)真空抽干，外觀呈松散狀態(tài),于4℃冰箱保存，保存期可達(dá)5～7年。

② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護(hù)劑（一般用脫脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管內(nèi)于-20～-30℃的乙醇浴中速凍。然后，在低溫下用真空泵抽干，并用五氧化二磷或干冰使水汽結(jié)凍，熔封安瓿管，于低溫下保存。保存期可達(dá)5～10年之久。

③ 石蠟油封存法，在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上后的石蠟油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低溫干燥處保存，此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物，保存期為一年以上。

菌種的使用范圍:

（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚，釀酒酵母菌組成成分，重復(fù)性強(qiáng)，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。 

（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營(yíng)養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。 

（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無(wú)機(jī)鹽類，或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。

微生物菌種的培養(yǎng)：

     ⒈ 孢子制備

     ⑴ 孢子的制備

     一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

     ⑵ 霉菌孢子的制備

     霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

     ⒉ 種子制備

     ⑴ 搖瓶種子制備

     搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

     ⑵ 種子罐種子制備

    BL21 DE3 大腸桿菌培養(yǎng) 種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為種子，把子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。

橢孢青霉 Penicillium ellipsoideosporum

托姆青霉 Penicillium thomii

土正青霉 Eupenicillium terrenum

土星漢遜酵母 Hansenula saturnus

腎皮層上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

NRG1 Others Human  NRG1-beta 1 (ECD) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

MR1 [derivative of HB-11048]中國(guó)倉(cāng)鼠X小鼠B細(xì)胞雜交瘤 MR1 [derivative of HB-11048] Chinese hamster X mouse B lymphocyte hybridoma RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

IGFBP6 Protein Human 重組 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HBE(支氣管上皮樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基CM

DAPI   mg1-Naphthol5

D-Biotin(D-生物素)   1g1-Monopalmitin54241-棕櫚酸單甘油酯

D-Cellobiose D-纖維二糖   5g 1-Methyl-L,5-dihydroorotic acid336591-甲基-L,5-二氫乳清酸

DCPIP 2,6-二氯靛酚鈉   1g 1-Methyl-aminomethyl naphthalene144895

DEAE Sepharsoe FF   0ml 1-Methyl-nitroH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35432

人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:VCAM1, CD106, INCAM-100, vascular cell adhesion molecule 1 Human VCAM-1/CD106(Vascular Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組VCAM-1/CD106濃度