產(chǎn)品名稱(chēng)：蛋白酶K緩沖液

規(guī)格：100ml

貨號(hào)：XG-RY2501

儲(chǔ)存條件：室溫,12個(gè)月

用途：酶反應(yīng)緩沖液

注意事項(xiàng)：主要由Tris-HCl、EDTA、氯化鈉組成。
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)、不得臨床。

產(chǎn)品屬性：

溶液的配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
使用方法：
1.  常用篩選濃度
注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn)，來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；植物細(xì)胞20-200μg/mL；300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1）  未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3）  替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2）   每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3）  篩選7天后觀(guān)察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中，充分溶解，用兩支玻璃瓶密封保存，做 好標(biāo)簽。
2 。在校正前，準(zhǔn)備ORP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3 。86毫伏：取50至100毫升PH7.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分?jǐn)嚢琛?/span>
4 。256毫伏：取50至100毫升PH4.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分?jǐn)嚢琛?5。 ORP標(biāo)準(zhǔn)液保存期為72hour。
標(biāo)準(zhǔn)品五大類(lèi)：
1、化學(xué)成分類(lèi)：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，純的化合物或是有代表性的基體樣品，天然的或添加(被)分析物的(如，用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪)，以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi)：與目錄A相似的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，但以一種或多種生化或臨床特性值表征，如酶活性。
3、物理特性類(lèi)：以一種或多種物理特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi)：以一種或多種工程特性值表征??標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如硬度、拉伸強(qiáng)度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細(xì)分為三級(jí)子類(lèi)，例如，在化學(xué)成分類(lèi)中，以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金，列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中；在化學(xué)成分類(lèi)別中，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)兩大類(lèi)；單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物)，或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液；這類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準(zhǔn)。
神經(jīng)粘附分子(NCAM/CD56)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒大腸埃希氏Phospho-CDCP1 (Tyr743) (D2G2J) Rabbit mAb

L1粘附分子(L1CAM/CD171)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 頭—50043VPRBP (D5K5V) Rabbit mAb

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒米羅布里格小單孢α-Smooth Muscle Actin Antibody

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒米曲霉CXCL10 (D5L5L) Rabbit mAb

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)性酪氨酸激酶2型受體(NTRK2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒蘇云金芽孢桿IFI16 (D8B5T) Rabbit mAb

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體3型(NTRK3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒大腸埃希TIM-1 (E1R9N) Rabbit mAb

神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 西西布哈加瓦氏β-Amyloid (1-42 Specific) (D9A3A) Rabbit mAb

蛋白(NPHN)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒谷氨酸棒狀桿ATCC13032β-Amyloid (1-42 Specific) (D9A3A) Rabbit mAb

腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTEAGE)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 米根霉β-Amyloid (pE3 Peptide) (D5N5H) Rabbit mAb

生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β(GROβ)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  慢生根瘤β-Amyloid (pE3 Peptide) (D5N5H) Rabbit mAb

生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ(GROγ)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  變異短波單胞CDCA2 (D7T4P) Rabbit mAb

生長(zhǎng)分化因子1(GDF1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒多粘芽孢桿CENP-E Antibody

生長(zhǎng)分化因子10(GDF10)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒美澳型核果褐腐病Phospho-Rad18 (Ser403) (D2T6W) Rabbit mAb

生長(zhǎng)分化因子11(GDF11)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黑曲霉IRGM Antibody (Rodent Specific)

生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒平菇eRF3 Antibody

蛋白酶K緩沖液100ml食欲素受體(多肽)Anti-DHPS Antibody兔卵泡抑素樣蛋白1（FSTL1）elisa檢測(cè)試劑盒

增殖潛能相關(guān)蛋白抗原Anti-DGKK Antibody猴白調(diào)節(jié)素（LR）elisa檢測(cè)試劑盒

p19ARF抑癌基因抗原Anti-DHRS11 Antibody猴白分化抗原30配體（CD30L）elisa檢測(cè)試劑盒

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38抗原Anti-DHRS4 Antibody猴平足蛋白（PDPN）elisa檢測(cè)試劑盒

絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原Anti-DHX8 Antibody兔生長(zhǎng)分化因子3（GDF3）elisa檢測(cè)試劑盒

腫瘤抑制基因抗原（野生型P53）Anti-DHX8 Antibody兔色素P450家族成員7A1（CYP7A1）elisa檢測(cè)試劑盒

突變型P53抗原Anti-DIABLO Antibody猴血小板衍生生長(zhǎng)因子受體β（PDGFRβ）elisa檢測(cè)試劑盒

野生型p53誘導(dǎo)基因1抗原Anti-DIAPH2 Antibody猴絲氨酸蛋白酶12（PRSS12）elisa檢測(cè)試劑盒

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