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接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50T甲型H1N1流感病毒(2009)PCR檢測(cè)試劑盒 | 50T |
BH-P63211 |
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
BCL7B BCL7B蛋白抗體
BNC2 堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體
BCL7C B細(xì)胞白血病/蛋白7抗體
BSCL2 先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體(常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17)
BTG1 B細(xì)胞遷移基因1抗體
BEAN1 脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白BEAN1抗體
B7-H6 B7H6蛋白抗體
BOb-1 B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體
BIN1 橋連整合因子蛋白抗體
BADH2 BADH2抗體(水稻)
BCHE(1E8) 丁酰膽堿酯酶單克隆抗體
phospho-beta catenin (Tyr142) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體
BDKRB2 緩激肽B2受體抗體
Butyrylcholinesterase (NT) 丁酰膽堿酯酶抗體(N端)
BCHE (CT) 丁酰膽堿酯酶抗體(C端)
BLAME BLAME抗體
Batroxobin(5H4) 巴曲霉單克隆抗體
Batroxobin 蛇毒巴曲酶抗體
BrdU 溴脫氧尿苷抗體
BAGE2 /抗原2.2抗體
BAGE3 /抗原2.3抗體
BAGE4 /抗原2.4抗體
BNP 腦鈉素/利鈉肽抗體
B-Raf B Raf抗體
BRCA1 乳腺癌易感基因1抗體
FANCB 乳腺癌易感基因2抗體
BrdU 溴脫氧尿苷抗體
BTG2 B細(xì)胞遷移基因2抗體
BMP2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抗體
BMP7 骨形態(tài)發(fā)生蛋白7抗體
Beta catenin β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體
Beta catenin β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體
BCCIP 乳腺癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體
Blood Group Antigen Precursor 血型抗原前體蛋白抗體
CD238 凱爾血型糖蛋白CD238抗體
BTN2A2 嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2抗體
腺苷酸激酶2抗體 TX-A2 ELISA Kit 血栓素A2合成酶(TX-A2)ELISA試劑盒
精子頂體前體蛋白抗體 TX-A2 ELISA Kit 血栓素A2(TX-A2)ELISA試劑盒
黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體 TpP ELISA Kit 血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒
未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體 CH50 ELISA Kit 血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒
鐵蛋白Fe65抗體 ST ELISA Kit 血清素/血清胺(ST)ELISA試劑盒
抑癌基因ras同源家族1抗體 SAP ELISA Kit 血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA試劑盒
轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體 SAA4 ELISA Kit 血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)ELISA試劑盒
心鈉素抗體 SAA3 ELISA Kit 血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒
丙氨酰tRNA合成酶2抗體 SAA ELISA Kit 血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒
絲氨酸抑制蛋白激酶C底物抗體 SDPR ELISA Kit 血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)ELISA試劑盒
核突觸蛋白α抗體 HSA ELISA Kit 血清白蛋白(HSA)ELISA試劑盒
自噬相關(guān)蛋白4B抗體 SGK2 ELISA Kit 血清/糖皮質(zhì)**調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)ELISA試劑盒
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體 GSK2 ELISA Kit 血清/糖皮質(zhì)**調(diào)節(jié)激酶2(GSK2)ELISA試劑盒
α-輔肌動(dòng)蛋白4抗體 HA ELISA Kit 血凝素(HA)ELISA試劑盒
堿性磷酸酶抗體 pFN ELISA Kit 血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒
50T甲型H1N1流感病毒(2009)PCR檢測(cè)試劑盒AU1 tag標(biāo)簽抗體 PS ELISA Kit 血漿抗凝蛋白S(PS)ELISA試劑盒
脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1 PC ELISA Kit 血漿抗凝蛋白C(PC)ELISA試劑盒
蛋白激酶B KLKB1 ELISA Kit 血漿激肽釋放酶(KLKB1)ELISA試劑盒
蛋白激酶B CETP ELISA Kit 血漿膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。