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產品詳情

  • 產品名稱：HUCCT1人膽管癌細胞

  • 產品型號：P-X781
  • 產品廠商：派瑞曼
  • 產品價格：0
  • 折扣價格：0
  • 產品文檔：
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簡單介紹：
HUCCT1人膽管癌細胞公司正在出售的產品：HO-8910PM人高轉移卵巢癌細胞貼壁細胞上皮細胞樣HO-8910PM:HO8910PM人細胞系組織來源：說明書土壤多酚氧化酶（PPO）測試盒大鼠胃泌素（GAS）elisa檢測試劑盒
詳情介紹：

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。

HUCCT1人膽管癌細胞

英文簡稱

規(guī)格

貨號

HUCCT1:HUCCT1

1×106

P-X781

產品詳情：

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認）

生長培養(yǎng)基:

RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2

推薦換液頻率 2-3次/周

參考資料(來源文獻)

年齡（性別） 男性；56歲

組織來源 膽管，腹水轉移

細胞類型 腫瘤細胞

腫瘤類型 肝膽癌細胞

生物等級 BSL-1

倍增時間 ~55 hours

保藏機構 JCRB; JCRB0425 RCB; RCB1960 TKG; TKG 0389

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。


一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二．細胞處理：

1）凍存細胞的復蘇：：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例：
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實驗原理：

公司正在出售的產品：

HIRA相互作用蛋白3抗體

己糖激酶結構域蛋白1抗體 HKDC1

HIRIP3

四分子交聯體14抗體（四旋蛋白） TSPAN14

4-羥基壬烯醛抗體

3號染色體開放閱讀框26抗體 C3orf26

4 Hydroxynonenal

1號染色體開放閱讀框98抗體 C1orf98

唐氏綜合癥細胞粘附分子2抗體 DSCAML1

鉀離子通道蛋白Kir7.1抗體

POLR2A單克隆抗體 RNA polymerase II / POLR2A

囊泡相關膜蛋白4抗體 VAMP4

Ras GTP酶活化蛋白結合蛋白1抗體 G3BP1

FCHSD2蛋白抗體 FCHSD2

泌乳素受體抗體 PRLR

FITC標記小鼠CD45.1單克隆抗體 mouse CD45.1/FITC

TUNEL流式細胞儀分析試劑盒

血管內皮生長因子C型單克隆抗體 VEGF-C

大鼠前列腺素E代謝物(PGEM)elisa檢測試劑盒

延伸因子G1抗體 GFM1

通用型LB培養(yǎng)液

蛋白酶體PSMα6抗體 Proteasome 20S alpha 6

兔降鈣素原(PCT)elisa檢測試劑盒

端粒酶抑制因子PinX-1抗體 PINX-1

鯨睪酮(T)elisa分析檢測試劑盒

小鼠骨成型蛋白2(BMP2)elisa檢測試劑盒

體液肌酸激酶（CK）活性酶動力比色法定量檢測試劑盒

HUCCT1人膽管癌細胞大鼠白介素18(IL－18)elisa檢測試劑盒

Cdc42鳥苷酸酶活性分析試劑盒

大鼠孕酮 PROG elisa檢測試劑盒

小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)elisa檢測試劑盒免費代測

載玻片細胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

實驗步驟：

1 將目的基因構建到合適的慢病毒載體上，利用293T細胞進行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉染前24 h進行細胞鋪板，轉染時細胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉細胞系。


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