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別 名 EMC1_HUMAN; ER membrane protein complex subunit 1; ER membrane protein complex subunit 1 precursor; 2700016F22Rik; C230096C10Rik; Emc1; Hypothetical protein LOC23065; K0090_HUMAN; KIAA0090; mKIAA0090; OTTHUMP00000215527; PSEC0263; RIKEN cDNA C230096C10 gene; RP1-43E13.1; RP23-371E13.1; Uncharacterized protein KIAA0090.
英文名稱 Anti-EMC1
中文名稱 腺樣癌特異性相關抗原EMC1抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Mouse
克隆類型 monoclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞生物 學 細胞膜蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 107kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EMC1
亞 型 IgG
抗體的熒光標記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結合。與FITC結合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳酸氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應的主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結合;
2.可逆性:抗原與抗體結合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml,定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。
抗體反應的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,如有適當濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應溫度。
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復染,脫水,透明。
14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?br>
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
大鼠阿米洛利敏感鈉通道α亞基(SCNN1A)試劑盒 HRH4/GPCR105 組織胺H4受體抗體
大鼠阿立新A(Orexin A)試劑盒 HCM mRNA cap甲基轉(zhuǎn)移酶抗體
大鼠阿黑皮素原(POMC)試劑盒 HCE 5’-三磷酸聚核苷酸抗體
大鼠δ氨基乙酰丙酸脫水酶(ALAD)試劑盒 HINT1 組氨酸三聚體核苷結合蛋白1抗體
大鼠γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)試劑盒 hCG alpha 4 甲狀腺促進alpha鏈
大鼠γ干擾素受體(IFN-γR)試劑盒 H7N9 NA A型流感病毒H7N9凝集素抗體
大鼠γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 HDAC3/HD3 組蛋白去乙?;?抗體
大鼠γ分泌酶試劑盒 HBsAg 人乙肝表面抗原抗體(包被)
大鼠γ-氨基丁酸受體亞基α1(GABRA1)試劑盒 HAVCR1 腎損傷分子1抗體(甲型肝炎病毒細胞受體1)
大鼠γ氨基丁酸(GABA)試劑盒 HPRG 組氨酸富含脯氨酸糖蛋白抗體
大鼠β-轉(zhuǎn)導重復相容蛋白(β-TrCP)試劑盒 HER3 HER3受體抗體
大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)試劑盒 Phospho-HER3 (Tyr1197) 磷酸化HER3受體抗體
大鼠β細胞素(BTC)試劑盒 Phospho-HER3 (Tyr1222) 磷酸化HER3受體抗體
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)試劑盒 Phospho-HER4 (Tyr1284) 磷酸化HER4抗體
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)試劑盒 Hemopexin 糖蛋白β-1B抗體
大鼠β羥丁酸(βOHB)試劑盒 Phospho-HSP27 (Ser15) 磷酸化熱休克蛋白27抗體
Ovine Herpesvirus 2(OHV-2)綿羊皰疹病毒2型LAMP試劑盒
Ovine Herpesvirus(OHV)綿羊皰疹病毒通用LAMP試劑盒
Ovine Parainfluenza 3綿羊副流感病毒3型RT-LAMP試劑盒
Ovine pulmonary adenocarcinoma virus(OPAV)綿羊肺腺瘤病病毒RT-LAMP試劑盒
Oxyspirura mansoni孟氏尖旋線蟲LAMP試劑盒
Paenibacillus larvae幼蟲芽孢桿菌LAMP試劑盒
Paracoccidioides brasiliensis巴西副球孢子菌LAMP試劑盒
Paracoccus denitrificans脫氮副球菌LAMP試劑盒
Parainfluenza Virus 1 (PIV-1)副流感病毒1型RT-LAMP試劑盒
Parainfluenza Virus 2 (PIV-2)副流感病毒2型RT-LAMP試劑盒
腺樣癌特異性相關抗原EMC1抗體Parainfluenza Virus 3 (PIV-3)副流感病毒3型RT-LAMP試劑盒
Parainfluenza Virus 4a (PIV-4a)副流感病毒4a型RT-LAMP試劑盒
Parainfluenza Virus 4b (PIV-4b)副流感病毒4b型RT-LAMP試劑盒
Parainfluenza Virus 5(PIV-5)副流感病毒5型RT-LAMP試劑盒
Parainfluenza Virus(PIV)副流感病毒通用RT-LAMP試劑盒
Paramushir病毒RT-LAMP試劑盒
Paranavirus(PARV)帕臘南病毒RT-LAMP試劑盒
Parascaris equorum馬蛔蟲LAMP試劑盒
Paravaccinia Virus副牛痘病毒RT-LAMP試劑盒
抗體的種類:
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的,體液性抗體由B淋細胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學結構和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多,對D的功能了解較少。
(1) IgG:是血清中濃度大的一類球蛋白,約占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后,其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體,分子量16萬~18萬,可以通過兔的胎盤,但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學反應中,參與沉淀反應、凝集反應、補體結合反應和中和反應。
(2) IgM:由5個球蛋白單位組成的五聚體,在血清中的含量僅次于IgG,分子量90萬,是體內(nèi)大的球蛋白。抗原初次刺激機體后,IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG,主要分布在血管內(nèi),可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細胞及中和病毒的作用。因其是五聚體,免作用很強,是IgG的100倍,但由于含量僅為IgG的1/10,且持續(xù)時間短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學反應中,參與凝集反應和補體結合反應。
(3) IgA:有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中,分子量約為17萬,亦稱為血清型IgA,有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中,如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液,以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA,由存在于粘膜和組織上的漿細胞產(chǎn)生,分子量40萬,含量較單體高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一種特殊的糖蛋白,為單位體結構,分子量19萬,由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結中的漿細胞所形成,在血清中含量甚微,是一種致敏抗體,容易吸附在**表面,當與相應抗原結合所引起過敏反應。在機體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。