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產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號：P-X634
  • 產(chǎn)品**：派瑞曼
  • 產(chǎn)品價格：0
  • 折扣價格：0
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹：
769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞貼壁細(xì)胞上皮細(xì)胞樣769-P:769P人細(xì)胞系組織來源：器官腎腎透明細(xì)胞腺癌豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)elisa檢測試劑盒大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)elisa檢測試劑盒
詳情介紹：

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。

769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞

英文簡稱

規(guī)格

貨號

769-P:769P

1×106

P-X634

產(chǎn)品詳情：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 769-P細(xì)胞來源于原發(fā)性透明細(xì)胞腺癌；769-P細(xì)胞呈邊界不清楚的球形、高核質(zhì)比、有微絨毛和橋粒；769-P細(xì)胞可以在軟瓊脂中生長。

年齡（性別） 女；63歲

組織來源 器官：腎；腎透明細(xì)胞腺癌

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 腎癌細(xì)胞

倍增時間 ~35 hours

致瘤性 Yes, forms colonies in soft agar.Yes, forms tumors in immunosuppressed hamsters.Yes, forms tumors in nude mice.

保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1933



一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例：
1、細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實驗原理：

公司正在出售的產(chǎn)品：

原鈣粘蛋白β5抗體

魚巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)elisa分析檢測試劑盒

PCDHB5

小鼠多胺氧化酶(PAOX)elisa檢測試劑盒

艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體

HumanC3bRELISAKit

HIV gp160

人補體片段3b受體(C3bR)elisa分析檢測試劑盒

大鼠Slit源物3(Slit3)elisa檢測試劑盒

MIF ELISA kit

10倍PCB濃縮緩沖溶液

NFATC2IP

人FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt-3L)elisa檢測試劑盒

7號染色體開放閱讀框34抗體

活化T細(xì)胞核因子胞漿相互作用蛋白2抗體

C7orf34

PE-Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgG H&L

甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體  Anti-TTF-2/FOXE1

Rabbit Anti-Rat IgG H&L / PE-Cy7

Patched/PTCH抗體  Anti-Patched/PTCH

SAP30樣蛋白抗體

骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)人  Anti-OPN/BSP

SAP30L

電壓門控鈉通道5α抗體  Anti-Nav1.5/SCN5A

人G蛋白偶合受體44(GPR44/CRTH2/DL1R)elisa分析檢測試劑盒

小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)elisa分析檢測試劑盒

HumanGPR44ELISAkit

769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞Hsp-70ELISAKit

大鼠白介素2可溶性受體β鏈(sIL-2Rβ)elisa分析檢測試劑盒

人肌養(yǎng)蛋白(dystrophin)elisa分析檢測試劑盒

sIL-2Rβ ELISA kit

HumandystrophinELISAKit

實驗步驟：

1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上，利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板，轉(zhuǎn)染時細(xì)胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。



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