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產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：A875人黑色素瘤細胞

  • 產(chǎn)品型號：P-X651
  • 產(chǎn)品**：派瑞曼
  • 產(chǎn)品價格：0
  • 折扣價格：0
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹：
A875人黑色素瘤細胞公司正在出售的產(chǎn)品：A673人橫紋肌瘤細胞貼壁生長多邊形細胞樣A673:A673人細胞系組織來源：肌肉；橫紋肌肉瘤GC（氣相）試劑盒小鼠白介素1受體Ⅱ(IL1R2)elisa檢測試劑盒
詳情介紹：

A-875；A875；人黑色素瘤細胞

英文簡稱

規(guī)格

貨號

A875:A875

1×106

P-X651

產(chǎn)品詳情：

細胞別稱：A-875；A875；人黑色素瘤細胞

種屬來源：人

年齡性別：40歲

組織來源：皮膚

生長特性：貼壁生長

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

背景簡介：該細胞是一株人黑色素瘤細胞系。A875細胞NGF受體陽性，可用于建立動物研究模型。

生物等級：

細胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達情況：

保藏機構：中國典型培養(yǎng)物保藏中心細胞庫

培養(yǎng)基：MEM+10%FBS+1%雙抗

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

倍增時間：

STR鑒定位點Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：8，12；D16S539：11，12；D18S51：17；D19S433：13.2，14；D21S11：28，30.2；D2S1338：20，24；D3S1358：14，15；D5S818：11，13；D7S820：8，11；D8S1179：11；FGA：22；TH01：9.3；TPOX：8，11；vWA：15，16；

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理：
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細胞處理：

1）凍存細胞的復蘇：：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例：
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實驗原理：

實驗步驟：

1 將目的基因構建到合適的慢病毒載體上，利用293T細胞進行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉染前24 h進行細胞鋪板，轉染時細胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉細胞系。

公司正在出售的產(chǎn)品：

NBPF7蛋白抗體

中性鞘磷脂2抗體

NBPF7

TRIM50蛋白抗體  Anti-TRIM50

細胞生長抑制蛋白26/前列腺特異性膜抗原樣蛋白抗體

H2N2 Hemagglutinin

FOLH1B

甲型流感病毒(H2N2)血凝素抗體

脯氨酸羥化酶抗體  Anti-PHD3

NSMase2

6磷酸果糖激酶抗體  Anti-PFKL/Fructose 6 Phosphate Kinase

phospho-MEK5 (Ser142)

絲氨酸蛋白酶抑制劑A10抗體  Anti-ZPI/SERPINA10

嗅覺受體5J2抗體

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體

OR5J2

大鼠α1抗胰蛋白酶前體(pre-α1-AT)elisa分析檢測試劑盒

乙型肝炎X蛋白HBX抗體（N端）  Anti-X protein/HB-X (N-Terminus)

pre-α1-AT ELISA Kit

背板膠質(zhì)乙酰酯酶抗體  Anti-NOTUM

人過氧化氫酶(CAT)elisa分析檢測試劑盒

單鏈結合蛋白70抗體  Anti-RPA70

CATELISAkit

分泌型卷曲相關蛋白1抗體  Anti-SFRP1

石蠟切片KUNEL測定試劑盒

酵母硫氰酸酶（rhodanase）活性比色法定量檢測試劑盒

大鼠纖維蛋白原(FG)elisa檢測試劑盒

A875人黑色素瘤細胞小鼠B細胞活化因子(BAFF/CD257/TNFSF13B)elisa檢測試劑盒

轉錄因子LMCD1抗體

血管加壓素激活鈣啟動受體蛋白1抗體

LMCD1

Cullin 5

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