公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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ProPakA.5細胞
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詳見說明書
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FS-016421
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實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低 1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
左心房（可提供標記服務(wù)）
左心室（可提供標記服務(wù)）
右心房（可提供標記服務(wù)）
右心室（可提供標記服務(wù)）
左心耳（可提供標記服務(wù)）
右心耳（可提供標記服務(wù)）
主動脈瓣（可提供標記服務(wù)）
心包膜（可提供標記服務(wù)）
室間隔（可提供標記服務(wù)）
房間隔（可提供標記服務(wù)）
心尖（可提供標記服務(wù)）
室前壁（可提供標記服務(wù)）
闌尾（可提供標記服務(wù)）
十二指腸（可提供標記服務(wù)）
乙狀結(jié)腸（可提供標記服務(wù)）
結(jié)腸（可提供標記服務(wù)）
空腸（可提供標記服務(wù)）
盲腸（可提供標記服務(wù)）
回腸（可提供標記服務(wù)）
直腸（可提供標記服務(wù)）
食管上段（可提供標記服務(wù)）
食管中段（可提供標記服務(wù)）
食管下段（可提供標記服務(wù)）
會厭（可提供標記服務(wù)）
肝臟（可提供標記服務(wù)）
植物過氧化氫 HYDROGENPEROXIDE 活性比色法定量檢測試劑盒 測定
氧化氫 HYDROGENPEROXIDE 活性比色法定量檢測試劑盒 測定
體液過氧化氫 HYDROGENPEROXIDE 活性比色法定量檢測試劑盒 測定
體液單胺氧化酶A型 MAO－A 活性比色法定量檢測試劑盒 測定
組織單胺氧化酶A型 MAO－A 活性比色法定量檢測試劑盒 測定
細胞單胺氧化酶A型 MAO－A 活性比色法定量檢測試劑盒 測定
體液單胺氧化酶 MAO 總活性比色法定量檢測試劑盒 測定
組織單胺氧化酶 MAO 總活性比色法定量檢測試劑盒 測定
細胞單胺氧化酶 MAO 總活性比色法定量檢測試劑盒 測定
體液黃嘌呤氧化酶活性熒光定量檢測試劑盒 測定
組織黃嘌呤氧化酶活性熒光定量檢測試劑盒 測定
細胞黃嘌呤氧化酶活性熒光定量檢測試劑盒 測定
體液黃嘌呤氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒 測定
組織黃嘌呤氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒 測定
APATHY封片液 測定
經(jīng)典水相封片液 測定
Bouin固著液 測定
ProPakA.5細胞軟組織固著液 Bouin固著液 測定
冰凍切片羅丹寧 RHODANINE 銅染色試劑盒 測定
細胞皮爾斯 PERLS-DAB 非血紅素鐵 三價 強化染色試劑盒 測定
冰凍切片皮爾斯 PERLS-DAB 非血紅素鐵 三價 強化染色試劑盒 測定
石蠟切片皮爾斯 PERLS-DAB 非血紅素鐵 三價 強化染色試劑盒 測定
細胞特恩布爾 TURNBULL 鐵 二價 染色試劑盒 測定
冰凍切片特恩布爾 TURNBULL 鐵 二價 染色試劑盒 測定
石蠟切片特恩布爾 TURNBULL 鐵 二價 染色試劑盒 測定
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