公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。 

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

紅膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒2,6-二硝苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品, 用于環(huán)境分析無水檸檬酸 CP, ≥99.0% (T)芹糖異甘草苷；異甘草苷芹糖

紅激因子(ESF)ELISA試劑盒2,4-二硝苯 CP檸檬酸,一水 Standard for GC白屈菜紅堿(標(biāo)準(zhǔn)品）

橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒3-氨基吡唑 98%檸檬酸,一水 ACS, 99.0-102.0%TAE684

亨廷頓相關(guān)蛋白1(HAP1)ELISA試劑盒4-(氯甲基)苯甲酰氯 98%檸檬酸鈉，二水  AR,99.0%青蒿酸(標(biāo)準(zhǔn)品)

黑素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子(MLZE)ELISA試劑盒3,4-二甲氧基苯酚 97%檸檬酸鈉，二水  CP,98.0%防己諾林堿

黑色素抗體(MC Ab)ELISA試劑盒3-羧基苯甲 97%二水合檸檬酸鈉 GR澳茄新堿

黑色素(MSH)ELISA試劑盒2-羥基-6-甲基煙酸 98%檸檬酸鈉，二水  ACS, ≥99.0% (NT)五水合硫酸金雀花堿/硫酸鷹爪豆堿(標(biāo)準(zhǔn)品)

黑色素濃縮(MCH)ELISA試劑盒醋酸丁酸纖維素 30-35%檸檬酸鈉，二水  用于分子生物學(xué), ≥99%（GC)五水合硫酸金雀花堿/硫酸鷹爪豆堿

黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒醋酸丁酸纖維素 35-39%4-甲氧基苯甲酰氯 97%N-甲基金雀花堿氫酸鹽

黑色素瘤相關(guān)抗原D4(MAGED4/MAGED4B)ELISA試劑盒醋酸丁酸纖維素 44-50%2-甲基-1,3- 99%辛弗林(標(biāo)準(zhǔn)品)

黑色素瘤活性抑制蛋白(MIA)ELISA試劑盒醋酸丁酸纖維素 50-54%納米羥基磷灰石 nanopowder,<100 nm particle size (BET), ≥97%辛弗林

黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)ELISA試劑盒2-氨基-8-萘酚-6-磺酸 90%，工業(yè)級(jí)硝酸鐿 99.9% metals basis辛弗林鹽酸鹽

核轉(zhuǎn)錄因子κBp65(NFκBp65)ELISA試劑盒1,5-二羥基萘 98% 氟化鐿 99.99% metals basis三尖杉寧堿(標(biāo)準(zhǔn)品）

核轉(zhuǎn)錄因子κB(NFκB)ELISA試劑盒4,4'-二苯乙烯二羧酸 96%硝酸鐿 99.99% metals basis吉莫斯特;吉美嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)

核因子κB抑制物激酶β(IKK-β)ELISA試劑盒蓖麻油酸 >97.0%(T),>70%(GC)羅丹明6G 高純級(jí)，95%吉莫斯特;吉美嘧啶

核因子κB抑制物激酶α(IKK-α)ELISA試劑盒1,3-酮二羧酸 97%安息香 99.5%蝙蝠葛諾林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)
RAMOS RA1細(xì)胞施氏假單胞菌

種屬: Pseudomonas stutzeri

分離基物: 人類的腦脊髓液

提供形式: 凍干粉

**等級(jí): 1

模式菌株: yes

應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株、分類研究，減少嘧啶堿類

培養(yǎng)基: NB

斯達(dá)氏油脂酵母

種屬: Lipomyces│starkeyi

分離基物: 油井

提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物

**等級(jí): 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 發(fā)酵產(chǎn)油脂

培養(yǎng)基: 13

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