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第2年
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細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) 細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng):1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。2.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。3.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎發(fā)布時(shí)間:2023-11-13 16:30 點(diǎn)擊次數(shù):111 次
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?細(xì)胞培養(yǎng)中血清主要用途 細(xì)胞培養(yǎng)中血清主要用途:1、提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。2、提供**和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)**(地塞米松)、類固醇**(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。3、提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及**等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)發(fā)布時(shí)間:2023-11-10 16:52 點(diǎn)擊次數(shù):126 次
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實(shí)時(shí)熒光定量PCR熒光物質(zhì)闡述 實(shí)時(shí)熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種:熒光探針和熒光染料。現(xiàn)將其原理簡(jiǎn)述如下:1.TaqMan熒光探針:PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可發(fā)布時(shí)間:2023-11-06 11:40 點(diǎn)擊次數(shù):81 次
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培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢可能原因及解決方法 培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢可能原因及解決方法:可能原因:1、由于更換不同培養(yǎng)液或血清;2、培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞;3、培養(yǎng)物中有少量**或**污染;4、試劑保存不當(dāng);5、接種細(xì)胞起始濃度太低;6、細(xì)胞已老化;7、支原體污染。解決方法:1、比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;2、換入新鮮配置培養(yǎng)液,或補(bǔ)加谷氨酰胺發(fā)布時(shí)間:2023-10-27 13:19 點(diǎn)擊次數(shù):1116 次
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TER雌激su受體ELISA試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備 TER雌激su受體ELISA試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。1、血清室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)發(fā)布時(shí)間:2023-10-16 10:28 點(diǎn)擊次數(shù):131 次
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貼壁細(xì)胞與懸浮細(xì)胞傳代 操作步驟:1、貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量發(fā)布時(shí)間:2023-10-09 14:22 點(diǎn)擊次數(shù):120 次
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AD人Adropin蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng) AD人Adropin蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):1、加樣:①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差;②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。2、溫育:①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件;②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察;③96孔板周圍孔與發(fā)布時(shí)間:2023-10-03 10:52 點(diǎn)擊次數(shù):114 次
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標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的五大類特性 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的五大類特性:1、化學(xué)成分類:標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。2、生物和臨床特性類:與目錄A相似的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。3、物理特性類:以一種或多種物理特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。4、工程特性類:以一種或多種工程特性值發(fā)布時(shí)間:2023-09-26 09:48 點(diǎn)擊次數(shù):115 次
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ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果分析方法 ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果分析方法:1、ELISA實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計(jì)算每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。2、平均OD值減去空白孔的OD值。3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 以減去本底后的OD值為X軸,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來(lái)作圖,比如CurveExpert1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對(duì)數(shù)、對(duì)數(shù)、四參發(fā)布時(shí)間:2023-09-18 16:22 點(diǎn)擊次數(shù):176 次
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影響培養(yǎng)基滅jun 效果的因素 影響培養(yǎng)基滅jun效果的因素:1、微生物種類:不同的微生物k值不同。2、初始菌量:在保持N值不變的前提下,t與初始菌量N0的對(duì)數(shù)成正比。3、培養(yǎng)基成份:油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性。4、傳熱與混合狀況:影響受熱均勻度。5、培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。6、蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和滅jun溫度。7、pH:酸性pH下可加快微生物熱死速率發(fā)布時(shí)間:2023-09-11 11:13 點(diǎn)擊次數(shù):148 次
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LAMP試劑盒PCR反應(yīng)的特異性決定因素 PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;②堿基配對(duì)原則;③TaqDNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;④靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及TaqDNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。發(fā)布時(shí)間:2023-08-30 10:27 點(diǎn)擊次數(shù):122 次
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大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟要點(diǎn) 大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟要點(diǎn):1.加樣:①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差;②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。2.溫育:①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件;②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察;③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力發(fā)布時(shí)間:2023-08-22 15:02 點(diǎn)擊次數(shù):164 次
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ELISA包被條件選擇指南 1.包被抗原的選擇包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被,對(duì)于含雜質(zhì)較多的抗原可以采用間接捕獲法包被(先用能夠與目的抗原反應(yīng)的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標(biāo)板上,再通過(guò)特異性反應(yīng)使抗原固相化)。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物,由于分子量太小,往往難于直接吸附在酶標(biāo)板上,一般都先使其與無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)如BSA等偶聯(lián),發(fā)布時(shí)間:2023-08-14 13:05 點(diǎn)擊次數(shù):140 次
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細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程 細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)zhi胎牛血清,10%。2、培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。3、凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。二.細(xì)胞處理:1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴發(fā)布時(shí)間:2023-08-07 10:35 點(diǎn)擊次數(shù):140 次
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選擇合適一抗要點(diǎn) 選擇合適一抗要點(diǎn):1、確定抗體的名字,注意中英文名字、它名、亞型等信息。2、確定你的實(shí)驗(yàn)類型,Elisa,WB,IHC,ICC,還是FACS。一般抗體的說(shuō)明書都會(huì)列出該抗體經(jīng)驗(yàn)證過(guò)適用于何種實(shí)驗(yàn)的類型,如果抗體說(shuō)明書沒(méi)有提及的應(yīng)用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型,而僅是說(shuō)明尚未經(jīng)過(guò)此種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,請(qǐng)根據(jù)說(shuō)明書列出的已驗(yàn)證的類型來(lái)選擇適合你實(shí)驗(yàn)的抗體。3、確定實(shí)驗(yàn)樣本的種屬,Human,發(fā)布時(shí)間:2023-08-01 10:37 點(diǎn)擊次數(shù):161 次