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第2年
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細(xì)胞轉(zhuǎn)染的途徑 轉(zhuǎn)染的途徑：轉(zhuǎn)染的途徑大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類(lèi)：1.物理介導(dǎo)：電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過(guò)物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例。2.化學(xué)介導(dǎo)：方法很多，如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽(yáng)離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù)。3.生物介導(dǎo)：方法有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染，和現(xiàn)在比較多見(jiàn)的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。理想細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法，應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)，是目發(fā)布時(shí)間：2024-12-23 15:50 點(diǎn)擊次數(shù)：6 次
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細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：1、進(jìn)無(wú)菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開(kāi)始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。2、操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開(kāi)或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過(guò)燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼，以防退火；燒過(guò)的器械要冷卻后才能使用；已吸過(guò)培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞發(fā)布時(shí)間：2024-12-16 11:48 點(diǎn)擊次數(shù)：12 次
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胎牛血清制備過(guò)程的主要步驟 胎牛血清制備過(guò)程的主要步驟：1、采集胎牛血液制備胎牛血清的第1步是采集胎牛的血液。這需要在專(zhuān)業(yè)場(chǎng)所進(jìn)行，確保采集的胎牛來(lái)自健康且受監(jiān)控的牧場(chǎng)。采集血液需要遵循倫理和動(dòng)物福利的法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)。確保供體是5-8月齡的牛胚胎。2、血液分離采集的胎牛血液會(huì)經(jīng)過(guò)離心分離，將血漿與血細(xì)胞分開(kāi)。血漿中包含了胎牛血清的大部分有利于細(xì)胞體外生長(zhǎng)和繁殖的營(yíng)養(yǎng)成分，如蛋白質(zhì)、生長(zhǎng)因子和**。3、過(guò)濾和清理分離后的血漿會(huì)經(jīng)過(guò)發(fā)布時(shí)間：2024-12-09 11:00 點(diǎn)擊次數(shù)：26 次
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雙抗夾心法實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng) 雙抗夾心法實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)：1、樣品稀釋?zhuān)海?）稀釋血清避免假陽(yáng)性的發(fā)生（把蛋白按照一定的倍數(shù)稀釋?zhuān)?0倍、20倍，將抗原進(jìn)行稀釋包被反應(yīng)；用稀釋好的陽(yáng)性參閱血清和陰性參閱血清進(jìn)行孵育后洗刷，加入酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，孵育洗滌，加入底物顯色，停止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，O.D值≥1.0的抗原稀釋度為適合的包被濃度。陰性參閱血清O.D值<0.1-0.2。這樣陽(yáng)性參閱血清和陰性參閱血清的O.D值就會(huì)有明發(fā)布時(shí)間：2024-12-03 13:58 點(diǎn)擊次數(shù)：37 次
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實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞復(fù)蘇具體過(guò)程 細(xì)胞復(fù)蘇是指將凍存在液氮里邊或者-80℃冰箱中的細(xì)胞解凍，再培養(yǎng)傳代。細(xì)胞復(fù)蘇應(yīng)采用快速融化的方法，這樣的目的是為了讓細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)融化，從而避免慢悠悠的融化，使得水分滲入細(xì)胞內(nèi)再結(jié)晶，從而對(duì)細(xì)胞再次造成傷害，從而影響細(xì)胞的存活率。細(xì)胞復(fù)蘇具體過(guò)程：1：細(xì)胞是凍在-80℃的環(huán)境里面的，所以拿出來(lái)后，應(yīng)該盡快去37℃水浴鍋里解凍（我一般是放在PE手套里面，然后在37攝氏度的水域上快速融化。發(fā)布時(shí)間：2024-11-26 15:06 點(diǎn)擊次數(shù)：54 次
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大鼠4-羥基壬烯酸(HNE)ELISA試劑盒樣本收集處理 大鼠4-羥基壬烯酸(HNE)ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)**吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知待測(cè)物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將待測(cè)物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。樣本收集處理：1.血清：室溫血液自然凝發(fā)布時(shí)間：2024-11-19 10:51 點(diǎn)擊次數(shù)：64 次
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常見(jiàn)的五種生化試劑盒的原理及用途 五種常見(jiàn)生化試劑盒的原理及用途：1、多酚氧化酶（PPO）活性檢測(cè)試劑盒（比色法）：多酚氧化酶（PPO）能夠催化Catechol產(chǎn)生醌，后者在525nm有特征光吸收，測(cè)定發(fā)布時(shí)間：2024-11-14 10:49 點(diǎn)擊次數(shù)：65 次
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標(biāo)準(zhǔn)品與對(duì)照品的管理?xiàng)l例 標(biāo)準(zhǔn)品與對(duì)照品的管理?xiàng)l例：1.規(guī)范購(gòu)入使用臺(tái)賬，嚴(yán)格表明購(gòu)入時(shí)間、生產(chǎn)批號(hào)、來(lái)源、數(shù)量、使用期限等內(nèi)容；申購(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌返呐?hào)要與新頒布標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌放?hào)相符；2.嚴(yán)格按照規(guī)定條件進(jìn)行儲(chǔ)存，標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌返男誀顦O不穩(wěn)定，對(duì)儲(chǔ)存條件和方式非?？量?；3.規(guī)范管理和使用：（1）嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求，由于標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌返牟环€(wěn)定性，若不安產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的要求操作，極易造成較大的誤差，從而影響檢測(cè)結(jié)果；（2）稱(chēng)發(fā)布時(shí)間：2024-11-06 10:42 點(diǎn)擊次數(shù)：92 次
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PCR反應(yīng)被抑制或效率較低調(diào)整過(guò)程 PCR反應(yīng)被抑制或效率較低調(diào)整過(guò)程:一旦確定反應(yīng)被抑制或效率較低，則可采取一些步驟將效率值重新調(diào)整到理想范圍內(nèi)。1、對(duì)于抑制作用，可去除模板濃度高的反應(yīng)孔并重新分析標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果效率重新回到110%以下，則分析良好。2、另一種解決方案是重新純化模板。切記應(yīng)延長(zhǎng)干燥時(shí)間，以去除乙醇沉淀過(guò)程中的乙醇，或采用另外的柱上洗滌液將離液鹽從硅膠純化物中去除。3、通過(guò)分析優(yōu)化可解決效率低下的問(wèn)題。此過(guò)程有時(shí)相對(duì)發(fā)布時(shí)間：2024-10-28 16:15 點(diǎn)擊次數(shù)：108 次
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標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用管理說(shuō)明 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一般是指一種確定了具有一個(gè)或多個(gè)足夠均勻的特性值的物質(zhì)或材料，作為分析測(cè)量行業(yè)中的“量具'，在校準(zhǔn)測(cè)量?jī)x器和裝置、評(píng)價(jià)測(cè)量分析方法、測(cè)量物質(zhì)或材料特性值和考核分析人員的操作技術(shù)水平，以及在過(guò)程中產(chǎn)品的質(zhì)量控制等領(lǐng)域起著*的作用。企業(yè)或?qū)嶒?yàn)室應(yīng)當(dāng)建立標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的科學(xué)管理制度，以保證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)全流程的可追溯性、使信息傳遞正確有效，保證流轉(zhuǎn)過(guò)程數(shù)量和貯存準(zhǔn)確、讓使用更規(guī)范與合理。一、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來(lái)源合發(fā)布時(shí)間：2024-10-23 17:01 點(diǎn)擊次數(shù)：86 次
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ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌過(guò)程操作技巧小結(jié) 聚苯乙烯因其具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能而被廣泛用于ELISA實(shí)驗(yàn)的固相載體，聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，因此需要通過(guò)洗滌**在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌在ELISA過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。上述提到的血清中存在紅細(xì)胞或纖維蛋白原，可以在加樣前離心時(shí)得到控制，同樣也可以通過(guò)適當(dāng)增加洗滌次數(shù)和浸泡時(shí)間減輕或避免對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，同樣，對(duì)于血發(fā)布時(shí)間：2024-10-16 14:35 點(diǎn)擊次數(shù)：119 次
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細(xì)胞培養(yǎng)操作 細(xì)胞培養(yǎng)操作：1)復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000rpm條件下離心3min，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第2天換液并檢查細(xì)胞密度。2)細(xì)胞傳代發(fā)布時(shí)間：2024-10-12 16:08 點(diǎn)擊次數(shù)：71 次
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檢測(cè)試劑盒保存方法 檢測(cè)試劑盒保存方法:1.檢測(cè)試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗刷液可能會(huì)有結(jié)晶分出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗刷時(shí)不影響成果。3.各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器，并常常校正其準(zhǔn)確性，以防止試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，引薦運(yùn)用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的一起做規(guī)范曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高發(fā)布時(shí)間：2024-10-06 10:20 點(diǎn)擊次數(shù)：98 次
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實(shí)時(shí)熒光定量PCR使用的熒光物質(zhì)原理簡(jiǎn)述 實(shí)時(shí)熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種：熒光探針和熒光染料。現(xiàn)將其原理簡(jiǎn)述如下：1.TaqMan熒光探針：PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可發(fā)布時(shí)間：2024-09-30 10:15 點(diǎn)擊次數(shù)：102 次
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從外觀和性能上篩選血清分析 在實(shí)際篩選時(shí)，主要從血清外觀和實(shí)驗(yàn)操作時(shí)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)進(jìn)行。從外觀上：1.顏色：根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度。胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血，因?yàn)樘ヅＱ迥δ懿?，紅細(xì)胞容易破裂；2.澄清度：高質(zhì)量的胎牛血清由于蛋白和脂類(lèi)等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡；3.血清沉淀：血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有影響，沉淀的發(fā)布時(shí)間：2024-09-23 10:23 點(diǎn)擊次數(shù)：92 次