如何檢測細胞活力

在細胞培養(yǎng)的過程中會有一些因各種原因而死亡的細胞，活細胞所占總細胞的比例叫做細胞活力，細胞的活力能夠更好的體現(xiàn)細胞的狀態(tài)。

在組織中分離細胞時，為了了解分離的過程對細胞是否有損傷，一般都會對細胞進行活力檢查。在細胞復蘇的過程中為了更好的判斷凍存和復蘇的效果，一般會通過細胞活力檢查的方式進行判斷。

細胞懸液制備后，常用活體染料臺盼藍對細胞染色，進行細胞計數(shù)。

那么臺盼藍是如何進行細胞計數(shù)的呢？

當正常細細胞膜完整時，臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色。當喪失活性或細胞膜不完整的細胞胞膜通透性增加，臺盼藍能進入細胞內而使細胞著色（藍色）。

正確操作步驟：

1. 配制4%臺盼藍母液：稱取4g臺盼藍，加少量蒸餾水研磨，加雙蒸水至100mL，用濾紙過濾，4℃保存。使用時用PBS稀釋至0.4%。

2. 胰酶消化貼壁細胞，制備單細胞懸液，并作適當稀釋（106 cells/mL）。

3. 取少量細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1混合，輕輕吹打混勻，染色2~3min。

4. 顯微鏡下觀察，死細胞著淺藍色并膨大，無光澤；活細胞保持正常形態(tài)，無色透明有光澤。若需計算活細胞率則將染色的細胞懸液滴入細胞計數(shù)板計數(shù)。

計算公式：活細胞率（%）= 活細胞總數(shù)/（活細胞總數(shù)+死細胞總數(shù)）×100%

注意事項：臺盼藍染細胞時，時間不宜過長。否則，部分活細胞也會著色，會干擾計數(shù)的準確性。