水樣病毒沉淀劑
水樣病毒沉淀劑低于1.7,考慮RNA降解,*常見的原因是RNA酶去除不徹底。
建議你1.EP管和tip用DEPC水泡,如果來不及也可以買現(xiàn)成的。
2.提取時注意低溫,防止RNA降解。
3.洗滌用的75%酒精用DEPC水配制,*后融解RNA的水也應(yīng)是DEPC水,或去RNA酶水。
4.提取的RNA盡快轉(zhuǎn)錄成cDNA,-70度保存時間不宜過長(一般不超過一個月)。
水樣病毒沉淀劑提RNA提取秘訣:
1.提取RNA過程應(yīng)該盡量快,不要太過仔細(xì),以減少RNA的降解
2.在吸取上清液時要小心,離心管盡量不要抖動和傾斜,保持其從離心機里拿出來的角度吸取,加入異丙醇的那一步要尤其小心,上清液不要貪多
3.水樣病毒沉淀劑干燥時不要太過
4.你跑的電泳是不是普通的瓊脂糖凝膠電泳?這個結(jié)果不是很準(zhǔn)確,因為在跑膠的過程當(dāng)中RNA也會降解,但并不一定你提取的RNA效果不好,一般情況下跑出來的電泳結(jié)果有3條帶,2000bp,1000bp,100多的位置各有一條帶,分別是28s,18s,5s,如果5S很亮,表示RNA降解
5.提完的RNA可以做反轉(zhuǎn)錄,水樣病毒沉淀劑然后用管家基因檢測,只要能擴(kuò)出明亮的條帶即對你的實驗沒有影響。注意:在用管家基因檢測時應(yīng)增加循環(huán)數(shù),以檢測是否有DNA污染。
XY860807 柱式無內(nèi)**質(zhì)粒DNAOUT 50次 XY880912 大提柱式質(zhì)粒 DNAOUT 5次|10次 XY881107 大提無內(nèi)**質(zhì)粒DNAOUT 5次|10次 XY880916 96孔板質(zhì)粒DNAOUT(離心法 ) 1次 XY870903 一步法質(zhì)粒 DNAOUT 2.0 50次|100次 XY880201 一步法無內(nèi)**質(zhì)粒DNAOUT 50次 XY871101 一步法大提質(zhì)粒DNAOUT 5次 XY880917 一步法96孔板質(zhì)粒DNAOUT(離心法) 1次 XY870804 一步法單菌落質(zhì)粒 DNAOUT 50次 XY880932 一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAOUT(離心法) 1次|5次 XY861202 一步式廣譜DNAOUT 10mL XY880930 微量樣品核酸提取試劑盒 50次|200次 XY8121001 液體樣品DNAOUT 50次 XY860607 液相內(nèi)****劑 100次|500次 XY860608 固相內(nèi)****劑 100g|500g