柱式糞便RNAout
柱式糞便RNAout低于1.7,考慮RNA降解,*常見(jiàn)的原因是RNA酶去除不徹底。
建議你1.EP管和tip用DEPC水泡,如果來(lái)不及也可以買(mǎi)現(xiàn)成的。
2.提取時(shí)注意低溫,防止RNA降解。
3.洗滌用的75%酒精用DEPC水配制,*后融解RNA的水也應(yīng)是DEPC水,或去RNA酶水。
4.提取的RNA盡快轉(zhuǎn)錄成cDNA,-70度保存時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)(一般不超過(guò)一個(gè)月)。
柱式糞便RNAout提RNA提取秘訣:
1.提取RNA過(guò)程應(yīng)該盡量快,不要太過(guò)仔細(xì),以減少RNA的降解
2.在吸取上清液時(shí)要小心,離心管盡量不要抖動(dòng)和傾斜,保持其從離心機(jī)里拿出來(lái)的角度吸取,加入異丙醇的那一步要尤其小心,上清液不要貪多
3.柱式糞便RNAout干燥時(shí)不要太過(guò)
4.你跑的電泳是不是普通的瓊脂糖凝膠電泳?這個(gè)結(jié)果不是很準(zhǔn)確,因?yàn)樵谂苣z的過(guò)程當(dāng)中RNA也會(huì)降解,但并不一定你提取的RNA效果不好,一般情況下跑出來(lái)的電泳結(jié)果有3條帶,2000bp,1000bp,100多的位置各有一條帶,分別是28s,18s,5s,如果5S很亮,表示RNA降解
5.提完的RNA可以做反轉(zhuǎn)錄,柱式糞便RNAout然后用管家基因檢測(cè),只要能擴(kuò)出明亮的條帶即對(duì)你的實(shí)驗(yàn)沒(méi)有影響。注意:在用管家基因檢測(cè)時(shí)應(yīng)增加循環(huán)數(shù),以檢測(cè)是否有DNA污染。
XY90404 柱式植物RNAOUT 2.0 50次
XY80903 大提柱式植物RNAOUT 5次
XY120503 柱式藻類(lèi)RNAOUT 50次
XY90704 土壤RNAOUT 50次
XY90705 柱式土壤RNAOUT 50次
XY60305 **RNAOUT 50次|250次
XY80804 柱式**RNAOUT 50次
XY80904 大提柱式**RNAOUT 5次
XY51102 **RNAOUT 100次|250次
XY80103 柱式**RNAOUT 50次
XY80905 大提柱式**RNAOUT 5次
XY3073 一管式病毒RNAOUT 50次|200次
XY71001 柱式病毒RNAOUT 50次
XY80922 96孔板病毒RNAOUT(離心法) 1次|5次
XY80104 一站式柱式miRNAOUT 50次
XY80906 一站式大提柱式miRNAOUT 5次
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