DNA提取 ：一、pAG415GAL-ccdB-HA實(shí)驗(yàn)原理
DNA是遺傳信息的載體，是*重要的生物信息分子，因此DNA的提取也是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中*重要、*基本的操作之一。我公司提供從各種不同來源的樣品（如**、**、血液、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物組織及植物組織等）中提取高純度基因組DNA的服務(wù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1、細(xì)胞裂解
● CTAB法 CTAB（hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基**基溴化銨）是一種陽離子去污劑，可融解細(xì)胞膜，并與核酸形成符合物。該復(fù)合物在高鹽溶液中（>0.7M NaCl）是可溶的，pAG415GAL-ccdB-HA通過有機(jī)溶劑抽提，去除蛋白、多糖、酚類等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來。此法多用于植物組織、**等材料。
● SDS法 SDS是一種陰離子去污劑，高溫（55℃-65℃）下可裂解細(xì)胞，使蛋白變性、染色體解析。常用于血液、**、酵母、動(dòng)物組織、細(xì)胞等樣品基因組DNA的提取。
● 其他方法 物理方法如機(jī)械剪切、超聲波破碎、勻漿等，化學(xué)方法如異硫氰酸胍、堿裂解、蛋白酶K消化等。
2、DNA分離純化
● 用酚/氯仿抽提裂解液，收集水相，乙醇沉淀DNA，*后用TE溶解DNA沉淀。
3、DNA的定量及檢測(cè)
● pAG415GAL-ccdB-HA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA片段的分子質(zhì)量。
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA濃度 DNA在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50ug/ml雙鏈DNA。提取的基因組DNA樣品濃度＝OD260×50ug/ml×稀釋倍數(shù)。
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA純度
一般用OD260/OD280值檢測(cè)DNA樣品的純度。OD260/OD280值約為1.7-1.9，說明DNA純度較好；若小于1.7有可能有蛋白污染；若大于2.0，說明有RNA污染或DNA已經(jīng)降解。
三、pAG415GAL-ccdB-HA樣品處理
因細(xì)胞結(jié)構(gòu)及所含成分不同，樣品預(yù)處理的方法也有差異。不同樣品的預(yù)處理方法大致如下：
● 植物組織——液氮研磨
● 動(dòng)物組織——?jiǎng)驖{、液氮研磨
● 培養(yǎng)細(xì)胞——蛋白酶K消化
● 細(xì) 菌——溶菌酶消化
● 酵 母——Lyticase消化、玻璃珠破碎
pAG415GAL-ccdB-HA注意：客戶*好提供新鮮的樣品或取樣后立即在低溫（-20℃或-70℃）冷凍保存的樣品，避免反復(fù)凍溶。
DNA純化
XY83660 非凍型組織DNA保存液 100mL|250mL
XY860910 非凍型血液DNA保存液 100mL|250mL
XY890315 非凍型尿液DNA保存液 15mL|100mL
XY880802 非凍型拭子DNA保存液 100mL(A)|100mL(B)
XY8130924 口腔采樣拭子 50支
XY8130925 鼻腔采樣拭子 50支
XY8130926 DNA樣品采集拭子 50支
XY8130927 宮頸采樣拭子 50支(A)|50支(B)
XY870603 土壤腐殖酸**劑 100mL
XY870302 一步離心式石蠟**劑 100次
XY890901 菌體內(nèi)****劑 200mL
XY860403 紅細(xì)胞裂解液A型(核酸純化) 100mL
XY890309 紅細(xì)胞裂解液B型(流式細(xì)胞分析用) 100mL
XY8130928 紅細(xì)胞裂解液C型(核酸純化) 100mL
XY8130989 白細(xì)胞裂解液 100mL
XY880603 微型離心管專用研磨杵 50只(A)|50套(B)
XY83670 動(dòng)物DNAOUT 100mL|250mL
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