賴氨酸tRNA合成酶(KARS)重組蛋白
來(lái)源: 原核表達(dá)
宿主:E.coli
內(nèi)**水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位:Secreted
預(yù)測(cè)分子量:15.7kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Thr21~Pro152 (Accession # Q6ISS4) with N-terminal His Tag
緩沖液成份磷酸鹽緩沖液:(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度> 95%
等電點(diǎn):5.5
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白,請(qǐng)參見(jiàn)活性蛋白。
規(guī)格:10μg 50μg 200μg 1mg 1g
賴氨酸tRNA合成酶(KARS)重組蛋白實(shí)驗(yàn)步驟:
1.設(shè)計(jì)目的重組蛋白質(zhì)的N端10-15個(gè)氨基酸的簡(jiǎn)并序列。
2.引物合成上述簡(jiǎn)并序列,同時(shí)設(shè)計(jì)合成目的基因反向引物。
3.PCR擴(kuò)展目的基因,這樣在目的基因的5‘端就引入了兼并序列,同時(shí)不改變氨基酸序列。
4.雙酶切,插入到目標(biāo)載體。
5.轉(zhuǎn)化。
6.挑選多個(gè)克?。ū热?00-200個(gè))到1.5ml EP管,直接誘導(dǎo)表達(dá)(記得帶上為改造克隆菌株的對(duì)照)。
7.SDS-PAGE檢測(cè)。
8.挑選高表達(dá)的多個(gè)克隆,測(cè)序。
賴氨酸tRNA合成酶(KARS)重組蛋白的表達(dá)策略優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn):
賴氨酸tRNA合成酶(KARS)重組蛋白分離純化原則總結(jié):
1.應(yīng)盡可能利用蛋白質(zhì)不同物理特性選擇所用的分離純化技術(shù),而不是利用相同技術(shù)多次純化;
2.不同的蛋白在性質(zhì)上有很大區(qū)別,每一步純化步驟都應(yīng)當(dāng)充分利用目的蛋白和雜質(zhì)成分物理性質(zhì)差異;
3.在純化早期階段要盡量減少處理體積,方便后續(xù)純化;
4.在純化后期階段,再使用造價(jià)高的純化方法,有利于純化材料的重復(fù)使用,減少再生復(fù)雜性。
賴氨酸tRNA合成酶(KARS)重組蛋白相關(guān)產(chǎn)品展示:IC004Rb011 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)重組蛋白 Recombinant Angiotensin I Converting Enzyme (ACE) Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
IC005Hu011 大型中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(LAT1)重組蛋白 Recombinant Large Neutral Amino Acid Transporter 1 (LAT1) Homo sapiens (Human)
IC005Ra011 腺苷A1受體(ADORA1)重組蛋白 Recombinant Adenosine A1 Receptor (ADORA1) Rattus norvegicus (Rat)
IC006Bo011 雙調(diào)蛋白(AREG)重組蛋白 Recombinant Amphiregulin (AREG) Bos taurus; Bovine (Cattle)
IC006Eq011 雙調(diào)蛋白(AREG)重組蛋白 Recombinant Amphiregulin (AREG) Equus caballus; Equine (Horse)
IC006Ga011 雙調(diào)蛋白(AREG)重組蛋白 Recombinant Amphiregulin (AREG) Chicken (Gallus)
IC006Hu011 雙調(diào)蛋白(AREG)重組蛋白 Recombinant Amphiregulin (AREG) Homo sapiens (Human)
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