組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)重組蛋白
來(lái)源: 原核表達(dá)
宿主:E.coli
內(nèi)**水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位:Secreted
預(yù)測(cè)分子量:15.7kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Thr21~Pro152 (Accession # Q6ISS4) with N-terminal His Tag
緩沖液成份磷酸鹽緩沖液:(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度> 95%
等電點(diǎn):5.5
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白,請(qǐng)參見(jiàn)活性蛋白。
規(guī)格:10μg 50μg 200μg 1mg 1g
組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)重組蛋白實(shí)驗(yàn)步驟:
1.設(shè)計(jì)目的重組蛋白質(zhì)的N端10-15個(gè)氨基酸的簡(jiǎn)并序列。
2.引物合成上述簡(jiǎn)并序列,同時(shí)設(shè)計(jì)合成目的基因反向引物。
3.PCR擴(kuò)展目的基因,這樣在目的基因的5‘端就引入了兼并序列,同時(shí)不改變氨基酸序列。
4.雙酶切,插入到目標(biāo)載體。
5.轉(zhuǎn)化。
6.挑選多個(gè)克隆(比如100-200個(gè))到1.5ml EP管,直接誘導(dǎo)表達(dá)(記得帶上為改造克隆菌株的對(duì)照)。
7.SDS-PAGE檢測(cè)。
8.挑選高表達(dá)的多個(gè)克隆,測(cè)序。
組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)重組蛋白的表達(dá)策略優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn):
組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)重組蛋白分離純化原則總結(jié):
1.應(yīng)盡可能利用蛋白質(zhì)不同物理特性選擇所用的分離純化技術(shù),而不是利用相同技術(shù)多次純化;
2.不同的蛋白在性質(zhì)上有很大區(qū)別,每一步純化步驟都應(yīng)當(dāng)充分利用目的蛋白和雜質(zhì)成分物理性質(zhì)差異;
3.在純化早期階段要盡量減少處理體積,方便后續(xù)純化;
4.在純化后期階段,再使用造價(jià)高的純化方法,有利于純化材料的重復(fù)使用,減少再生復(fù)雜性。
組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)重組蛋白相關(guān)產(chǎn)品展示:
IC024Hu013 心肌型蘭尼定受體2(RYR2)重組蛋白 Recombinant Ryanodine Receptor 2, Cardiac (RYR2) Homo sapiens (Human)
IC024Hu014 組蛋白1簇H2ad(HIST1H2AD)重組蛋白 Recombinant Histone Cluster 1, H2ad (HIST1H2AD) Homo sapiens (Human)
IC024Mu011 ***腺來(lái)源血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)重組蛋白 Recombinant Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF) Mus musculus (Mouse)
IC024Mu012 線粒體乙醛脫氫酶(ALDM)重組蛋白 Recombinant Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial (ALDM) Mus musculus (Mouse)
IC024Mu013 趨化因子C-C-基元受體10(CCR10)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 10 (CCR10) Mus musculus (Mouse)
IC024Mu021 ***腺來(lái)源血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)重組蛋白 Recombinant Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF) Mus musculus (Mouse)
IC024Mu022 趨化因子C-C-基元受體10(CCR10)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 10 (CCR10) Mus musculus (Mouse)
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