組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白
來源: 原核表達(dá)
宿主:E.coli
內(nèi)**水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位:Secreted
預(yù)測(cè)分子量:15.7kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Thr21~Pro152 (Accession # Q6ISS4) with N-terminal His Tag
緩沖液成份磷酸鹽緩沖液:(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度> 95%
等電點(diǎn):5.5
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白,請(qǐng)參見活性蛋白。。
規(guī)格:10μg 50μg 200μg 1mg 1g
組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白實(shí)驗(yàn)步驟:
1.設(shè)計(jì)目的重組蛋白質(zhì)的N端10-15個(gè)氨基酸的簡并序列。
2.引物合成上述簡并序列,同時(shí)設(shè)計(jì)合成目的基因反向引物。
3.PCR擴(kuò)展目的基因,這樣在目的基因的5‘端就引入了兼并序列,同時(shí)不改變氨基酸序列。
4.雙酶切,插入到目標(biāo)載體。
5.轉(zhuǎn)化。
6.挑選多個(gè)克?。ū热?00-200個(gè))到1.5ml EP管,直接誘導(dǎo)表達(dá)(記得帶上為改造克隆菌株的對(duì)照)。
7.SDS-PAGE檢測(cè)。
8.挑選高表達(dá)的多個(gè)克隆,測(cè)序。
組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白的表達(dá)策略優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn):
組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白分離純化原則總結(jié):
1.應(yīng)盡可能利用蛋白質(zhì)不同物理特性選擇所用的分離純化技術(shù),而不是利用相同技術(shù)多次純化;
2.不同的蛋白在性質(zhì)上有很大區(qū)別,每一步純化步驟都應(yīng)當(dāng)充分利用目的蛋白和雜質(zhì)成分物理性質(zhì)差異;
3.在純化早期階段要盡量減少處理體積,方便后續(xù)純化;
4.在純化后期階段,再使用造價(jià)高的純化方法,有利于純化材料的重復(fù)使用,減少再生復(fù)雜性。
組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白相關(guān)產(chǎn)品展示:
IC027Hu014 Thimet脫寡肽酶1(THOP1)重組蛋白 Recombinant Thimet Oligopeptidase 1 (THOP1) Homo sapiens (Human)
IC027Hu021 紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)重組蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR) Homo sapiens (Human)
IC027Mu011 紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)重組蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR) Mus musculus (Mouse)
IC027Mu012 泛素激活酶樣蛋白(UBE1L)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein (UBE1L) Mus musculus (Mouse)
IC027Ra011 紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)重組蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR) Rattus norvegicus (Rat)
IC027Ra012 O-6-甲基鳥嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MGMT)重組蛋白 Recombinant O-6-Methylguanine DNA Methyltransferase (MGMT) Rattus norvegicus (Rat)
IC027Ra013 泛素激活酶樣蛋白(UBE1L)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein (UBE1L) Rattus norvegicus (Rat)
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