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產(chǎn)品資料

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白
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  • 產(chǎn)品名稱:組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白
  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 產(chǎn)品展商:I&C
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白將目的基因連接在表達(dá)載體后,通過加入誘導(dǎo)劑IPTG誘導(dǎo)目的基因表達(dá)。表達(dá)載體除具有蛋白表達(dá)所需要的啟動(dòng)子外,在終止子前有6個(gè)His編碼序列,便于蛋白的親和層析純化。組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白,請(qǐng)參見活性蛋白。
產(chǎn)品描述

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白

來源: 原核表達(dá)

宿主:E.coli

內(nèi)**水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位:Secreted

預(yù)測(cè)分子量:15.7kDa

實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Thr21~Pro152 (Accession # Q6ISS4) with N-terminal His Tag

緩沖液成份磷酸鹽緩沖液:(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度> 95%

等電點(diǎn):5.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白,請(qǐng)參見活性蛋白。。   

規(guī)格:10μg 50μg 200μg 1mg 1g

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白實(shí)驗(yàn)步驟:

1.設(shè)計(jì)目的重組蛋白質(zhì)的N端10-15個(gè)氨基酸的簡并序列。

2.引物合成上述簡并序列,同時(shí)設(shè)計(jì)合成目的基因反向引物。

3.PCR擴(kuò)展目的基因,這樣在目的基因的5‘端就引入了兼并序列,同時(shí)不改變氨基酸序列。

4.雙酶切,插入到目標(biāo)載體。

5.轉(zhuǎn)化。

6.挑選多個(gè)克?。ū热?00-200個(gè))到1.5ml EP管,直接誘導(dǎo)表達(dá)(記得帶上為改造克隆菌株的對(duì)照)。

7.SDS-PAGE檢測(cè)。

8.挑選高表達(dá)的多個(gè)克隆,測(cè)序。

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白的表達(dá)策略優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白分離純化原則總結(jié):

1.應(yīng)盡可能利用蛋白質(zhì)不同物理特性選擇所用的分離純化技術(shù),而不是利用相同技術(shù)多次純化;

2.不同的蛋白在性質(zhì)上有很大區(qū)別,每一步純化步驟都應(yīng)當(dāng)充分利用目的蛋白和雜質(zhì)成分物理性質(zhì)差異;

3.在純化早期階段要盡量減少處理體積,方便后續(xù)純化;

4.在純化后期階段,再使用造價(jià)高的純化方法,有利于純化材料的重復(fù)使用,減少再生復(fù)雜性。

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