轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族V成員1(TKL1)重組蛋白
來(lái)源: 原核表達(dá)
宿主:E.coli
內(nèi)**水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位:Secreted
預(yù)測(cè)分子量:15.7kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Thr21~Pro152 (Accession # Q6ISS4) with N-terminal His Tag
緩沖液成份磷酸鹽緩沖液:(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度> 95%
等電點(diǎn):5.5
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白,請(qǐng)參見(jiàn)活性蛋白。。
規(guī)格:10μg 50μg 200μg 1mg 1g
轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族V成員1(TKL1)重組蛋白實(shí)驗(yàn)步驟:
1.設(shè)計(jì)目的重組蛋白質(zhì)的N端10-15個(gè)氨基酸的簡(jiǎn)并序列。
2.引物合成上述簡(jiǎn)并序列,同時(shí)設(shè)計(jì)合成目的基因反向引物。
3.PCR擴(kuò)展目的基因,這樣在目的基因的5‘端就引入了兼并序列,同時(shí)不改變氨基酸序列。
4.雙酶切,插入到目標(biāo)載體。
5.轉(zhuǎn)化。
6.挑選多個(gè)克隆(比如100-200個(gè))到1.5ml EP管,直接誘導(dǎo)表達(dá)(記得帶上為改造克隆菌株的對(duì)照)。
7.SDS-PAGE檢測(cè)。
8.挑選高表達(dá)的多個(gè)克隆,測(cè)序。
轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族V成員1(TKL1)重組蛋白的表達(dá)策略優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn):
轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族V成員1(TKL1)重組蛋白分離純化原則總結(jié):
1.應(yīng)盡可能利用蛋白質(zhì)不同物理特性選擇所用的分離純化技術(shù),而不是利用相同技術(shù)多次純化;
2.不同的蛋白在性質(zhì)上有很大區(qū)別,每一步純化步驟都應(yīng)當(dāng)充分利用目的蛋白和雜質(zhì)成分物理性質(zhì)差異;
3.在純化早期階段要盡量減少處理體積,方便后續(xù)純化;
4.在純化后期階段,再使用造價(jià)高的純化方法,有利于純化材料的重復(fù)使用,減少再生復(fù)雜性。
轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族V成員1(TKL1)重組蛋白相關(guān)產(chǎn)品展示:
IC010Hu013 蛋白Z依賴性蛋白酶抑制因子(ZPI)重組蛋白 Recombinant Protein Z Dependent Protease Inhibitor (ZPI) Homo sapiens (Human)
IC010Hu014 真核翻譯起始因子4A2(EIF4A2)重組蛋白 Recombinant Eukaryotic Translation Initiation Factor 4A2 (EIF4A2) Homo sapiens (Human)
IC010Hu021 結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)重組蛋白 Recombinant Connective Tissue Growth Factor (CTGF) Homo sapiens (Human)
IC010Mu011 結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)重組蛋白 Recombinant Connective Tissue Growth Factor (CTGF) Mus musculus (Mouse)
IC010Mu012 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP1)重組蛋白 Recombinant Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 1 (LRP1) Mus musculus (Mouse)
IC010Mu013 蛋白Z依賴性蛋白酶抑制因子(ZPI)重組蛋白 Recombinant Protein Z Dependent Protease Inhibitor (ZPI) Mus musculus (Mouse)
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