腫瘤壞死因子α(TNFα)重組蛋白
來源: 原核表達
宿主:E.coli
內(nèi)**水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位:Secreted
預(yù)測分子量:15.7kDa
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Thr21~Pro152 (Accession # Q6ISS4) with N-terminal His Tag
緩沖液成份磷酸鹽緩沖液:(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度> 95%
等電點:5.5
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白,請參見活性蛋白。
規(guī)格:10μg 50μg 200μg 1mg 1g
腫瘤壞死因子α(TNFα)重組蛋白實驗步驟:
1.設(shè)計目的重組蛋白質(zhì)的N端10-15個氨基酸的簡并序列。
2.引物合成上述簡并序列,同時設(shè)計合成目的基因反向引物。
3.PCR擴展目的基因,這樣在目的基因的5‘端就引入了兼并序列,同時不改變氨基酸序列。
4.雙酶切,插入到目標載體。
5.轉(zhuǎn)化。
6.挑選多個克隆(比如100-200個)到1.5ml EP管,直接誘導(dǎo)表達(記得帶上為改造克隆菌株的對照)。
7.SDS-PAGE檢測。
8.挑選高表達的多個克隆,測序。
腫瘤壞死因子α(TNFα)重組蛋白的表達策略優(yōu)點和缺點:
腫瘤壞死因子α(TNFα)重組蛋白分離純化原則總結(jié):
1.應(yīng)盡可能利用蛋白質(zhì)不同物理特性選擇所用的分離純化技術(shù),而不是利用相同技術(shù)多次純化;
2.不同的蛋白在性質(zhì)上有很大區(qū)別,每一步純化步驟都應(yīng)當充分利用目的蛋白和雜質(zhì)成分物理性質(zhì)差異;
3.在純化早期階段要盡量減少處理體積,方便后續(xù)純化;
4.在純化后期階段,再使用造價高的純化方法,有利于純化材料的重復(fù)使用,減少再生復(fù)雜性。
腫瘤壞死因子α(TNFα)重組蛋白相關(guān)產(chǎn)品展示:
C046Bo011 S100鈣結(jié)合蛋白A10(S100A10)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A10 (S100A10) Bos taurus; Bovine (Cattle)
IC046Hu011 糖蛋白130(gp130)重組蛋白 Recombinant Glycoprotein 130 (gp130) Homo sapiens (Human)
IC046Hu012 利鈉肽受體3(NPR3)重組蛋白 Recombinant Natriuretic Peptide Receptor 3 (NPR3) Homo sapiens (Human)
IC046Hu013 核糖體蛋白L6(kl6)重組蛋白 Recombinant Ribosomal Protein L6 (kl6) Homo sapiens (Human)
IC046Hu014 S100鈣結(jié)合蛋白A10(S100A10)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A10 (S100A10) Homo sapiens (Human)
IC046Hu021 糖蛋白130(gp130)重組蛋白 Recombinant Glycoprotein 130 (gp130) Homo sapiens (Human)
IC046Mu011 糖蛋白130(gp130)重組蛋白 Recombinant Glycoprotein 130 (gp130) Mus musculus (Mouse)
IC046Mu012 S100鈣結(jié)合蛋白A10(S100A10)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A10 (S100A10) Mus musculus (Mouse)
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