中文名稱:D2-羥基戊二酸二乙酯脫氫酶(D2HGDH)重組蛋白
英文名稱:Recombinant D2-Hydroxyglutarate Dehydrogenase (D2HGDH)
英文簡稱:D2HGD
規(guī)格:10μg 50μg 200μg 1mg 1g
來源:原核表達(dá)
宿主:E.coli
怎么樣構(gòu)建含有標(biāo)簽的D2-羥基戊二酸二乙酯脫氫酶(D2HGDH)重組蛋白載體:
首先把表達(dá)標(biāo)簽載體選擇好了,是HA還是FLAG、HIS還是EGFP等等,然后確定目的克隆蛋白編碼DNA的來源,可以購買,也可以自己從基因組DNA中PCR之后就是要把兩者接在一起,首先要根據(jù)表達(dá)載體選擇酶切位點(diǎn),之后把PCR產(chǎn)物酶切,然后純化酶切產(chǎn)物,再用連接酶把載體和目前DNA連接起來,再純化就可以了。
D2-羥基戊二酸二乙酯脫氫酶(D2HGDH)重組蛋白的組氨酸標(biāo)簽怎么去掉:
PET-32a的His tag分別在前面的trx蛋白C端以及你的目標(biāo)蛋白C端,如果你的目的蛋白在構(gòu)建載體的時(shí)候自己加了終止子,那么你的目的蛋白C端是沒有His tag的,也就是說**一個(gè)his tag在trx與你的蛋白之間(PET32a是融合蛋白),這樣,PET-32a提供的兩個(gè)肽鏈內(nèi)切酶(凝血酶和腸激酶)都是可以切掉的,當(dāng)然,個(gè)人建議你用腸激酶,因?yàn)槟c激酶酶切位點(diǎn)更貼近你的目的蛋白,而用凝血酶的話還有一個(gè)S tag。如果你在構(gòu)建載體的時(shí)候,下游引物沒有加終止子,那么你的蛋白的N端也會有一個(gè)His Tag,這時(shí)候你需要用TAGZyme了,這個(gè)酶專一性去除his tag的。
D2-羥基戊二酸二乙酯脫氫酶(D2HGDH)重組蛋白來源細(xì)胞和**有何區(qū)別:
1,古生菌的細(xì)胞壁是由多糖、糖蛋白和蛋白質(zhì)組成的,*常見的細(xì)胞壁類型是類結(jié)晶表面層.真**G+的細(xì)胞壁主要含有肽聚糖,有的含有磷壁酸;G-含有稀疏的肽聚糖和脂多糖、蛋白和周質(zhì).
2,古生菌與真**在細(xì)胞膜成分上的主要不同如:磷脂的疏水尾由異戊二烯重復(fù)單位組成,親水頭(甘油)與疏水尾間通過醚鍵連接,細(xì)胞膜的側(cè)鏈由不同的化合物構(gòu)成,**和真核生物的酸沒有這些側(cè)分支。
D2-羥基戊二酸二乙酯脫氫酶(D2HGDH)重組蛋白相關(guān)蛋白列表:
IC599Hu061 顆粒酶A(GZMA)重組蛋白 Recombinant Granzyme A (GZMA) Homo sapiens (Human)
IC599Hu511 顆粒酶A(GZMA)重組蛋白 Recombinant Granzyme A (GZMA) Homo sapiens (Human)
IC599Mu011 顆粒酶A(GZMA)重組蛋白 Recombinant Granzyme A (GZMA) Mus musculus (Mouse)
IC599Mu012 肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(AKL4)重組蛋白 Recombinant Actin Related Protein 2/3 Complex Subunit 4 (AKL4) Mus musculus (Mouse)
IC599Mu021 肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(AKL4)重組蛋白 Recombinant Actin Related Protein 2/3 Complex Subunit 4 (AKL4) Mus musculus (Mouse)
IC599Mu022 顆粒酶A(GZMA)重組蛋白 Recombinant Granzyme A (GZMA) Mus musculus (Mouse)
IC599Ra011 肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(AKL4)重組蛋白 Recombinant Actin Related Protein 2/3 Complex Subunit 4 (AKL4) Rattus norvegicus (Rat)
IC600Hu011 顆粒酶B(GZMB)重組蛋白 Recombinant Granzyme B (GZMB) Homo sapiens (Human)
IC600Hu012 牛痘相關(guān)激酶1(VRK1)重組蛋白 Recombinant Vaccinia Related Kinase 1 (VRK1) Homo sapiens (Human)
IC600Hu013 泛素結(jié)合酶E2C結(jié)合蛋白E2I(UBE2I)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin Conjugating Enzyme E2I (UBE2I) Homo sapiens (Human)
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