Protein A+G Agarose (Fast Flow, 1ml)預(yù)裝柱
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品包裝
產(chǎn)品價(jià)格
XY2028
1個(gè)
368.00元
Protein A+G Agarose (Fast Flow)預(yù)裝柱(Protein A Agarose Prepacked Column, Fast Flow)是一種簡(jiǎn)便、快速、高效的用于抗體純化、**沉淀(Immunoprecipitation, IP)或**共沉淀(Co-IP)的即用型預(yù)裝柱,也稱層析柱(Chromatography column)或純化柱(Purification column)。本產(chǎn)品也可用于實(shí)驗(yàn)中抗原抗體復(fù)合物的分離純化。 Protein A是一種發(fā)現(xiàn)于金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的細(xì)胞壁表面蛋白,分子量為42kDa;Protein G是C型或G型鏈球菌(Streptococcal bacteria)表達(dá)的**球蛋白結(jié)合蛋白。Protein A和Protein G功能相似,能特異性地與哺乳動(dòng)物**球蛋白(Immunoglobulin, Ig)結(jié)合,結(jié)合的部位通常為**球蛋白的Fc區(qū),但有資料顯示Protein A也會(huì)和人VH3家族的Fab區(qū)結(jié)合,而Protein G有時(shí)與Fab區(qū)也有一定結(jié)合。同時(shí),兩者對(duì)于不同的**球蛋白亞類的結(jié)合能力有所不同。適當(dāng)重組改造的Protein A、G與瓊脂糖凝膠(agarose)以一定的方式結(jié)合,可用于**沉淀或抗體的純化。 使用本品經(jīng)過(guò)一步親和層析,即可從樣品中得到高純度的抗體,應(yīng)用廣泛。本產(chǎn)品為即用型預(yù)裝柱,適合于培養(yǎng)液、血清、腹水或雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清中的IgG的純化,或含Fc片段的重組蛋白的純化。Protein A+G Agarose適合于**沉淀所有Protein A Agarose和Protein G Agarose單獨(dú)可以**沉淀的抗體,包括human IgG1、IgG2、IgG3、IgG4,mouse IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3,rat IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c,rabbit IgG,rabbit、goat多克隆抗體。下表是Protein A、Protein G、Protein A+G Agarose產(chǎn)品與人、小鼠、大鼠常見(jiàn)的**球蛋白亞類的結(jié)合能力及不同物種的總結(jié)合能力情況表。
Species
Ig
Protein A
Protein G
A+G
Human
IgG1
++++
IgG2
IgG3
-
IgG4
IgA
++
IgD
IgE
IgM
Mouse
+
IgG2a
IgG2b
+++
+/-
Rat
IgG2c
Total Ig
Rabbit
Goat
Chicken
Cow
Guinea Pig
Hamster
Horse
Pig
Sheep
++++: Strong Binding
++~+++: Medium Binding
+: Weak Binding
+/-: Weak or No Binding
-: No Binding
本預(yù)裝柱中使用的Protein A和Protein G為重組蛋白,特異性強(qiáng)。本產(chǎn)品中的重組Protein A和Protein G可與多數(shù)哺乳動(dòng)物IgG的Fc端特異性結(jié)合,分子量分別為34.8kDa和22.5KDa。該重組Protein A和Protein G通過(guò)改造,僅保留了與IgG Fc端結(jié)合相關(guān)的氨基酸序列,去除了結(jié)合位點(diǎn)以外可能導(dǎo)致非特異性結(jié)合的序列,從而可以有效減少非特異性結(jié)合。每個(gè)Protein A分子和Protein G分子可分別結(jié)合5個(gè)和2個(gè)IgG分子。 本預(yù)裝柱中的瓊脂糖物理化學(xué)穩(wěn)定,有相對(duì)較高的線性流速。本產(chǎn)品中的Protein A和Protein G共價(jià)連接到4%的高交聯(lián)度、高流速瓊脂糖(cross-linked, 4% Agarose, Fast Flow)上,并按1:1比例混合。每毫升Protein A+G agarose beads (沉淀物)偶聯(lián)有約4mg的重組Protein A和Protein G。每毫升Protein A+G agarose beads (沉淀物)可以結(jié)合約18-50mg human IgG。本產(chǎn)品中agarose beads的平均直徑為90μm,蛋白純化時(shí)的推薦線性流速為50-400cm/h,耐壓指數(shù)為0.008MPa。 本預(yù)裝柱可重復(fù)次數(shù)多。本預(yù)裝柱再生后,重復(fù)使用10次幾乎不影響其結(jié)合能力。 本預(yù)裝柱具有標(biāo)準(zhǔn)接口,使用方便。本類型的預(yù)裝柱為高純度聚丙烯柱體,低吸附,規(guī)格有1ml和5ml兩種,魯爾接口,可適配商品化的各類中壓液相純化系統(tǒng),如?KTA系統(tǒng)(也被稱為AKTA系統(tǒng))等;也可通過(guò)適當(dāng)軟管連接注射器或蠕動(dòng)泵上樣。 本類型的預(yù)裝柱有1ml和5ml兩種,相應(yīng)的體積為Protein A+G Agarose在預(yù)裝柱中壓實(shí)后的體積,并保存在20%乙醇溶液中。 包裝清單:
包裝
-
說(shuō)明書(shū)
1份
保存條件: 4℃保存,一年有效。請(qǐng)勿冷凍。 注意事項(xiàng): 請(qǐng)勿冷凍保存本產(chǎn)品。 包裝中的下堵頭請(qǐng)保存好,用于預(yù)裝柱再生后的密封。 從蛋白樣品收集開(kāi)始,所有步驟中蛋白樣品都必須在4℃或冰上操作。 請(qǐng)按照IgG*大結(jié)合量的80%以內(nèi)準(zhǔn)備樣品,抗體純化效果更佳。一般血清的總IgG含量在10-15mg/ml。細(xì)胞培養(yǎng)上清中的抗體濃度與雜交瘤克隆密切相關(guān),胎牛血清(FBS)中的抗體也同時(shí)會(huì)被純化。 本產(chǎn)品**于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或**,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 為了您的**和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。