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第2年
- 入駐時(shí)間: 2021-06-18
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影響抗原抗體反應(yīng)的兩大因素 抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質(zhì)參加,仍不出現(xiàn)可見反應(yīng)。為了促使沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%氯化鈉或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。由于氯化鈉在水溶液中解離成Na+和C1-,可分別中和膠體粒子上的電荷,使膠體粒子的電勢(shì)下降。當(dāng)電勢(shì)降至臨界電勢(shì)(12~15mV)以下時(shí),則能促使抗原抗體復(fù)合物從溶液中析出,形成可見的沉淀物或凝集物。一、溫度在一定范圍內(nèi),發(fā)布時(shí)間:2024-09-18 15:15 點(diǎn)擊次數(shù):162 次
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試劑盒選購的注意事項(xiàng) 試劑盒選購的注意事項(xiàng):1.要仔細(xì)閱讀試劑盒的說明書,對(duì)試劑盒選用方法有所了解,科學(xué)研究工作時(shí)應(yīng)選擇參考方法試劑盒,醫(yī)療預(yù)防工作應(yīng)選擇推薦的常規(guī)方法試劑盒,或選擇公認(rèn)的測(cè)定方法試劑盒。此外,對(duì)試劑盒的組成、方法性能指標(biāo)加以分析,是用于手工操作,還是用于自動(dòng)分析儀。屬于后者,其實(shí)驗(yàn)參數(shù)是否與本單位自動(dòng)分析儀的實(shí)驗(yàn)參數(shù)相符。2.有無衛(wèi)生部的批準(zhǔn)文號(hào)。凡已列入衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)體外診斷試劑審批管理范圍的試劑盒發(fā)布時(shí)間:2024-09-10 10:45 點(diǎn)擊次數(shù):117 次
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PCR反應(yīng)主要成份Taq DNA聚合酶分析 一般TaqDNA聚合酶活性半衰期為92.5℃130min,95℃40min,97℃5min。現(xiàn)在人們又發(fā)現(xiàn)許多新的耐熱的DNA聚合酶,這些酶的活性在高溫下活性可維持更長(zhǎng)時(shí)間。TaqDNA聚合酶的酶活性單位定義為74℃下,30min,摻入10nmol/LdNTP到核酸中所需的酶量。TaqDNA聚合酶的一個(gè)致命弱點(diǎn)是它的出錯(cuò)率,一般PCR中出錯(cuò)率為2×10-4核苷酸/每輪循環(huán),在利用PCR克隆和進(jìn)行序發(fā)布時(shí)間:2024-08-29 16:53 點(diǎn)擊次數(shù):143 次
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?影響蛋白質(zhì)鹽析因素分析 蛋白質(zhì)通過鹽析的辦法沉淀的原理是降低蛋白質(zhì)的溶解度,使蛋白質(zhì)凝聚而從溶液中析出。影響鹽析的若干因素如下:1.蛋白質(zhì)濃度高濃度蛋白溶液可以節(jié)約鹽的用量,但許多蛋白質(zhì)的b和Ks常數(shù)十分接近,若蛋白濃度過高,會(huì)發(fā)生嚴(yán)重的共沉淀作用;在低濃度蛋白質(zhì)溶液中鹽析,所用的鹽量較多,而共沉淀作用比較少,因此需要在兩者之間進(jìn)行適當(dāng)選擇。用于分步分離提純時(shí),寧可選擇稀一些的蛋白質(zhì)溶液,多加一點(diǎn)中性鹽,使共沉淀作用減至發(fā)布時(shí)間:2024-08-20 10:06 點(diǎn)擊次數(shù):250 次
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RT-LAMP檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)使用方法 RT-LAMP檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)使用方法:一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。1.標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。2.用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。3.在7號(hào)管中加入5μL陽性對(duì)照(濃度為1×10E8拷貝/發(fā)布時(shí)間:2024-08-15 15:34 點(diǎn)擊次數(shù):165 次
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防血清揮發(fā)的方法 防發(fā)揮的方法 1、使用前:必須滅活處理,56℃30分鐘。對(duì)于一些品質(zhì)高的胎牛血清和新牛血清可以考慮不經(jīng)滅活直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。 2、儲(chǔ)存條件:一般儲(chǔ)存于-20℃,同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購買大包裝的血清后,首先要滅活處理,然后分裝成小包裝,儲(chǔ)存于-20℃,使用前融化。融化時(shí)現(xiàn)置于4℃。融化后的血清在4℃不宜長(zhǎng)時(shí)間存放,應(yīng)盡快使用。 3、使用濃度:自從有了合成培養(yǎng)基,血清就是作為一種添加成分與合成培發(fā)布時(shí)間:2024-08-08 10:21 點(diǎn)擊次數(shù):166 次
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WB封閉液的選用要求 封閉是WesternBlot 至關(guān)重要的一部分,所以正確的封閉液選擇可以讓抗體更特異地和抗原結(jié)合,為成功的WB奠定基礎(chǔ)。封閉液的選用要求:1、常用封閉液為脫脂牛奶(光明或伊利等)、牛血清白蛋白(BSA)、無蛋白封閉液等。2、封閉液濃度:封閉時(shí)一般用5%脫脂牛奶,也可用1-5%BSA或1%無蛋白封閉液;配制二抗稀釋液一般為1-5%脫脂牛奶,全部用PBS稀釋。3、封閉時(shí)間:室溫1-2h、4度過夜或37發(fā)布時(shí)間:2024-07-31 13:58 點(diǎn)擊次數(shù):1229 次
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小鼠8異前列腺素ELISA試劑盒操作步驟 操作步驟:1. 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。4.發(fā)布時(shí)間:2024-07-24 09:58 點(diǎn)擊次數(shù):144 次
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細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建病毒法步驟 細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建病毒法步驟:1、確定目標(biāo)細(xì)胞系的相關(guān)信息,細(xì)胞的培養(yǎng)條件,細(xì)胞的增值速度,支原體污染情況;2、預(yù)實(shí)驗(yàn)確定MOI值,可通過查閱文獻(xiàn)確定慢病毒在目標(biāo)細(xì)胞系中的MOI值也可參考查閱得到的數(shù)據(jù),設(shè)計(jì)梯度實(shí)驗(yàn),摸索合適MOI;3、預(yù)實(shí)驗(yàn)確定篩選**用量,常用的**篩選有:puro、G418、潮霉素等;4、細(xì)胞鋪板,將需要的細(xì)胞量接種于合適的培養(yǎng)皿中;5、細(xì)胞感染,通過接種的細(xì)胞量及預(yù)實(shí)驗(yàn)得來的發(fā)布時(shí)間:2024-07-16 16:27 點(diǎn)擊次數(shù):134 次
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ELISA試劑盒鑒定方法詳述 鑒別方法:Ⅰ:利用干擾實(shí)驗(yàn)即可辨別elisa試劑盒是否檢測(cè)目的抗原,方法如下:1、將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測(cè)抗體配置成antibody:antigen≈1:2的混合孵育液。2、37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測(cè)抗體3、后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物4、實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測(cè)其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢發(fā)布時(shí)間:2024-07-10 14:29 點(diǎn)擊次數(shù):162 次
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ELISA實(shí)驗(yàn)顯色淡結(jié)果分析 ELISA(酶聯(lián)**吸附試驗(yàn))是一種用于檢測(cè)抗原或抗體濃度的**學(xué)試驗(yàn)。如果ELISA實(shí)驗(yàn)的顯色淡或靈敏度低,可能有多種原因。ELISA實(shí)驗(yàn)顯色淡的原因及解決方案: 原因一:試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng),溫度太高。 解決方案:盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,夏季應(yīng)放冰塊降溫。 原因二:試劑盒未充分平衡。 解決方案:試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃發(fā)布時(shí)間:2024-06-24 16:00 點(diǎn)擊次數(shù):151 次
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血清的保存注意事項(xiàng) 血清的保存注意事項(xiàng):1、需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月.由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?2、熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,發(fā)布時(shí)間:2024-06-17 11:10 點(diǎn)擊次數(shù):180 次
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胎牛血清挑選標(biāo)準(zhǔn) 胎牛血清挑選標(biāo)準(zhǔn):1.看產(chǎn)地不同產(chǎn)地的胎牛血清,品質(zhì)也是相差甚遠(yuǎn)。值得注意的是,胎牛血清是動(dòng)物源生物制品,我國對(duì)于動(dòng)物源制品的進(jìn)口一直有很嚴(yán)格的規(guī)定,目前我國批準(zhǔn)進(jìn)口的胎牛血清來源是澳大利亞、新西蘭和烏拉圭(劃重點(diǎn)!),合法正規(guī)途徑進(jìn)口的胎牛血清必須在產(chǎn)品包裝上標(biāo)注血源地。這意味著,其他血源地的胎牛血清在我國是不允許進(jìn)口的,在選購進(jìn)口產(chǎn)品時(shí),要規(guī)避選取來源為禁止輸入國家的相關(guān)產(chǎn)品。 2.看資質(zhì)合法發(fā)布時(shí)間:2024-06-03 14:37 點(diǎn)擊次數(shù):120 次
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細(xì)胞復(fù)蘇與凍存 1、細(xì)胞復(fù)蘇:①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。②在000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。2、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種1、棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗-2次,加入mL0.25%(T25瓶)2、-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,發(fā)布時(shí)間:2024-05-23 11:38 點(diǎn)擊次數(shù):107 次
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細(xì)胞凍存原理 當(dāng)細(xì)胞所處溫度低于0°C時(shí),細(xì)胞脫水,細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶,冰晶的大小對(duì)細(xì)胞的影響是不同的,大冰晶容易造成細(xì)胞膜、細(xì)胞器的損傷和破裂,故造成復(fù)蘇出來的細(xì)胞存活率、狀態(tài)等與凍存前的狀態(tài)相差甚遠(yuǎn)。因此,我們?cè)趦龃婕?xì)胞的時(shí)候會(huì)采取兩個(gè)措施,一加入低溫保護(hù)劑,二慢凍細(xì)胞。凍存時(shí)機(jī):細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好、密度約為80-90%、數(shù)目一般為106-107/ml,活力差的細(xì)胞在凍存后的成活率很發(fā)布時(shí)間:2024-05-14 16:10 點(diǎn)擊次數(shù):110 次