提供的小鼠胰腺星狀細(xì)胞取自新鮮的組織,按照標(biāo)準(zhǔn)操作流程分離培養(yǎng)。研發(fā)的小鼠胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基(CM-M016)能提供細(xì)胞*佳的生長條件,降低雜細(xì)胞污染,保證不同批次間細(xì)胞質(zhì)量的穩(wěn)定。
同時(shí),還建立了嚴(yán)格的細(xì)胞鑒定流程,所提供的原代細(xì)胞均需經(jīng)過細(xì)胞類型特異性標(biāo)記物、細(xì)胞形態(tài)學(xué)等檢測,保證細(xì)胞純度在90%以上;同時(shí)也需經(jīng)過微生物檢測,保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、**及其他類型的**。
購買小鼠胰腺星狀細(xì)胞(細(xì)胞培養(yǎng)基)注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購買供的完全培養(yǎng)基。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
小鼠胰腺星狀細(xì)胞
細(xì)胞基本技術(shù)
凍存細(xì)胞的復(fù)蘇
小鼠胰腺星狀細(xì)胞應(yīng)遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調(diào)至37-37.5度,取出凍存的細(xì)胞迅速放入后將細(xì)胞面浸至水面以下不斷搖動(dòng)至融化。
在無菌臺(tái)內(nèi)將完全培養(yǎng)基加入50ml的小培養(yǎng)瓶內(nèi),約5ml左右,然后用無菌吸管從凍存管內(nèi)取出細(xì)胞,置培養(yǎng)并內(nèi)輕輕搖晃,使細(xì)胞均勻后置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
傳代:
貼壁細(xì)胞:
對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml完全培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入完全培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞:
一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入完全培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
凍存
將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以完全培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日保存到液氮中。
小鼠胰腺星狀細(xì)胞
支原體污染及檢測:
(1).支原體污染在細(xì)胞培養(yǎng)中*常見、不易被查覺,但支原體污染可顯著影響細(xì)胞功能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。支原體是介于**和病毒之間的目前所知能獨(dú)立生活的*小微生物,它無細(xì)胞壁,形態(tài)呈高度多形性,*小直徑0.2um,可通過濾器。
1膀胱癌細(xì)胞
支原體在污染細(xì)胞后,它通過影響細(xì)胞的DNA、RNA 的合成及急速消耗培養(yǎng)基中的氨基酸來抑制細(xì)胞的生長,并能降低細(xì)胞的融合率。因此,在運(yùn)用各種細(xì)胞系進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究時(shí),首先要證明所用細(xì)胞有無支原體的污染。
經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,不含有**、**、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體。
(2).支原體污染后,培養(yǎng)基可不發(fā)生渾濁,細(xì)胞病變輕微或不明顯,因此難以發(fā)現(xiàn)。目前,支原體檢測的方法有以下幾種。
(a).相差顯微鏡觀察;
(b).低張?zhí)幚淼匾录t染色法;
(c).熒光染色法;
(d).酶標(biāo)法;
(e).PCR法:基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心使用該方法進(jìn)行檢測。
優(yōu)點(diǎn):靈敏度高,檢測耗時(shí)短,樣品量小
(只需50ul細(xì)胞培養(yǎng)用液上清)。
缺點(diǎn):引物及制劑費(fèi)用較高。
★★★★★希望這些基本技術(shù)及資料可以幫到您★★★★★
小鼠胰腺星狀細(xì)胞
特點(diǎn):
1.傳代情況:P2
2.活性好、穩(wěn)定性高、適應(yīng)性強(qiáng),易培養(yǎng)
3.傳代快、多:2-3天傳一代,普通可傳10代以上 腫瘤細(xì)胞無限制
4.純度高達(dá)95% 無污染和其他雜細(xì)胞
5.有技術(shù)疑問可以提供一對(duì)一的解答:專業(yè),及時(shí),耐心
6.貨期短,一般凍存管5-7個(gè)工作日,復(fù)蘇7-15個(gè)工作日。
★我?guī)旒?xì)胞近3000種,來源于美國ATCC.
種屬來源:小鼠、大鼠、人、猴、牛
組織來源: 各組織癌細(xì)胞、表皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、等等....
細(xì)胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制。
- 溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
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